染色的凝胶用水漂洗数遍,沥干水后置于染色皿中,再加入100 ml脱色液,加盖,脱色至染色的凝胶经脱色后能清晰显示出蛋白条带止。
SDS-PAGE检测蛋白表达(protein expression) 一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,PH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,PH6.8;电泳缓冲液,PH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板,电泳电源架,电泳槽, 一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L...
2. SDS-PAGE是一种常用的分析蛋白质大小和纯度的方法，常与Western blot等技术结合使用，有助于确定目标蛋白是否成功表达以及其纯度。3. 酶活检测的方法选择要根据ju体酶的底物和反应机制来确定，不同酶的检测方法可能会有所不同。反正，蛋白的异源表达、SDS-PAGE检测以及酶活检测是在蛋白研究中常用的...
且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相 载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。操作步骤 1、SDS－PAGE电泳2、转膜3、免疫反应 4、化学发光 5、凝胶图象分析 ...
免疫印迹,SDS-PAGE,蛋白定量 三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器 材料 1.5mlEP管(康宁生命科学有限公司);15mlEP管(康宁生命科学有限公司);50mlEP管(康宁生命科学有限公司);1000ml量筒;200ml量筒;100ml量筒;10ml量筒;研磨珠、1000ul移液枪(Eppendorf);200ul移液枪(Eppendorf)、100ul移液枪(Eppendorf);20ul移液...
考马斯亮蓝用于聚丙烯酰胺凝胶电泳后的蛋白质染色,蛋白质对染料的吸附量与蛋白质的量大致成正比,符合比尔-朗勃定律。目前已经建立了很多用银盐对SDS-PAGE分离的多肽染色的方法,基本原理都是利用银离子结合在氨基酸侧链上之后还原程度的差异。常用的银盐有银铵溶液和硝酸银,检测灵敏度都高出考马斯亮蓝R-250染色100~...
1.目的 学习SDS-PAGE的基本操作,学会用SDS-PAGE检测蛋白。 2.原理 蛋白质在加热变性以后与SDS结合,带上负电荷,在电场的作用下,向正极移动,结果按分子量大小排列在胶板上,含量多的蛋白带纹粗。 3.器材 旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml 微量离心管,
1.目的 学习SDS-PAGE的基本操作,学会用SDS-PAGE检测蛋白。 2.原理 蛋白质在加热变性以后与SDS结合,带上负电荷,在电场的作用下,向正极移动,结果按分子量大小排列在胶板上,含量多的蛋白带纹粗。 3.器材 旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5m
SDS-PAGE的检出限大约是在25~50纳克之间，如果蛋白的表达量低于SDS-PAGE检出限的话，可以考虑用Western-Blot检测。
可以从这方面想想办法。比如，其下游基因表达水平也许可以间接反映这个蛋白的水平。这样的话，设计个引物...