1、SDS-PAGE电泳用到的试剂有丙烯酰胺(Acr),交联剂(Bio),过硫酸铵(APS)和四甲基乙二胺TEMED。 2、网状立体结构的凝胶,所以我们也叫垂直电泳,因为是定性检测蛋白质,也叫蛋白电泳。 二、SDS-PAGE电泳技术原理 SDS是一种阴离子型去污剂,在蛋白样品液中加入SDS和巯基乙醇后,巯基乙醇可打开二硫键,SDS能打开蛋白质...
(1)清洗玻璃板 一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。 SDS-PAGE电泳仪器 (2)灌胶与上样 玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶)。根据蛋白分子量的不同配制不同浓度的分离胶,加入 T...
实验用品（溶液配制说明详见文章下方）蛋白样品，SDS-PAGE loading buffer，PBS，Tris-Hcl (PH 8.8)， Tris-Hcl (PH 6.8) ，30%丙烯酰胺，10%SDS，10%过硫酸，5×SDS-PAGE电泳缓冲液，考马斯亮蓝R-250染色液，脱色液。实验步骤一、凝胶配置1．分离胶的配制（1）找出配套的胶板，用擦镜纸擦干净，并固定...
SDS-PAGE凝胶..使用流程: 1. 提前30分钟将试剂盒从4℃冰箱拿出,取0.1g AP一支加入1ml纯水溶解即为10%AP溶液。室温下复温其它试剂使所有试剂完全溶解。2. 选择合适的分离胶浓度和体积,按照分离胶配置表
SDS-PAGE电泳具体步骤SDS电泳具体步骤 一、清洗玻璃板 1、洗洁精轻轻擦洗 2、自来水冲 3、蒸馏水冲 4、筐里晾干 5、梳子用水洗 二、配胶 材料:玻璃板、梳子、架子、枪(100-1000、20-200、2-20)、DDW、30%Arc-Bis、Tris(pH8.8)、Tris(pH6.8)、10%SDS、10%AP、TEMED。 1、玻璃板对齐后放入夹中卡紧 ...
SDS-PAGE电泳标准操作流程SDS-PAGE 电泳标准操作规程(网上) 3.程序: 3.1. 制胶 3.1.1 组装胶架 将洁净、无水的玻片对齐,形成空腔,插入塑料框的凹槽中,注意箭头向上,并确保下 端平齐。放于制胶架上夹紧,下端紧贴密封条。 3.1.2 分离胶的配置 3.1.2.1 10%分离胶配方如下表: 10%胶 蒸馏水 30%Acr-Bis(...
5按如下体积配制6?浓缩胶30ml?混匀?ddh2o10molltrishclph6830acrbis20ml400ul600ul10sds10aptemed36ul24ul4ul6将上层重蒸水倾去?滤纸吸干?灌制浓缩胶?插入样品梳?7装好电泳系统?加入电极缓冲液?上样20l SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)实验原理和操作步骤 实验原理: SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及...
此外,SDS还能够疏水化蛋白质,使其保持线性构象。 二、流程操作步骤 1.制备凝胶: a.准备获得所需蛋白质分子量范围内的分离凝胶(通常为8-20%)和浓缩凝胶(通常为4%)。 b.根据实验需要,自制聚丙烯酰胺凝胶,或购买预铸凝胶片。 c. 使用缓冲液(常见的是Tris-HCl缓冲液)将凝胶片激活。 d.将激活的凝胶放在垂直...
SDS-PAGE 测蛋白分子量 试剂准备与操作步骤(2007-06-15 22:58:43) SDS-PAGE 测量蛋白分子量 所需试剂及仪器: 试剂:丙烯酰胺,双丙烯酰胺,Tris-base,TEMED,SDS,过硫酸铵,甘油,溴酚兰,甘氨 酸,DTT,考马斯亮蓝 R-250,甲醇,冰醋酸,蛋白 Marker5 只(50ul 装),小牛血清白蛋 白 10mg。 仪器设备:电泳仪、...
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒操作步骤 SDS-PAGE Gel Kit SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 目录号:K0022 组分说明及保存条件 Catalog no. K0022 K0022A Size 40-60块胶 200-300块胶 保存条件 30%Acr-Bis(29:1) 100 ml 500 ml 2-8ºC 分离胶缓冲液 100 ml 500 ml 2-8ºC 浓缩胶缓冲液 50 ml 250 ml 2-...