对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间,具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。一旦你确定了你的样品中蛋白质的浓度和你想要的上样量,你就可以计算出需要上样的体积。 公式是:上样体积(µl) = 上样量(µg) / 蛋白质浓度(µg/µl)。 在SDS-PAGE实验中,样品...
一般来说,对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间。具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。 一旦你确定了你的样品中蛋白质的浓度和你想要的上样量,你就可以计算出需要上样的体积。 公式是:上样体积(µl) = 上样量(µg) / 蛋白质浓度(µg/µl)。 在SDS-PAGE实...
一般认为是 ug 量级.以每条带 能观察到的蛋白质总量为比较对象.1. 跟你的样品纯度有关.如果是一个纯蛋白,需要上样量就极少,可以到1ug 甚至更少.如果有10条带的话,那就增加总量大概10倍(10种蛋白含量相当的话),使你的目标能看到为止,实践中需要摸索尝试.2. 跟染色方法有关,银染色比考马斯亮蓝法染色敏...
首先做BCA定量；常用蛋白质量20-30ug，这样去÷定量后的蛋白样本浓度得到蛋白上样体积；然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算，最后用双蒸水补齐。聚丙烯酰胺凝胶电泳（英语： polyacrylamide gel electrophoresis，简称PAGE） ，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，用于分离蛋白...
然后根据你的上样缓冲液浓度和SDS胶的情况去选择计算，最后用双蒸水补齐。当然，也有大神不做蛋白定量...
没什么特别要注意的吧，就是点样不容易，点样槽不容易看出来，要仔细辨认。再来就是点样时要注意手上的力道，不能打太多溢出来，相邻的几个样品就被污染了，整个胶板也有可能要重做。也不能提前松手，要不然移液枪会吸到胶，一管样品就报废了 好像就这么多吧，也不是什么太难的操作 ...
SDS-PAGE电泳法测定蛋白质分子量 实验目的 学习并掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法和测定蛋白质分子量的技术 实验原理 1.蛋白质混合样品中各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带电荷多少等因素所造成的电泳迁移率有差别。在聚丙烯酰胺凝胶系统中，加入一定量十二烷基硫酸钠（SDS），形成蛋白质-SDS复合物，这种复合物...
蛋白上样量的选择 要根据具体情况决定,对于考马斯亮蓝染色,如果样品为菌体蛋白样品,有至少50条以上的条带要显出来,需要上样量在15 μg左右即可,如果蛋白条带少于6条,如蛋白Marker或纯化阶段后期的蛋白样品,上样量可减少至2 μg即可显出清晰的条带。【简化...
sdspage电泳 样品的量应该多少 浓度没有硬性要求，但上样时的蛋白质总量最好在50-100ug左右。条带才比较明显可见。如若上样前浓度很低，可进行冻干，把体积浓缩一下测完蛋白浓度后上样。常规样品都不用去管PH值,因为上样缓冲液中含有TRIS-HCl,缓冲力比较强,可以中和你样品PH.除非你样品中盐离子(...