SDS-PAGE凝胶电泳是浓缩胶缓冲液浓度,分离胶缓冲液浓度,样品缓冲液浓度,都是以什么为依据设计的? 答案 凝胶的浓度大小不同所对应的凝胶孔径大小也不同,浓度小的孔径大,浓度小的孔径小,一般分离胶用12%的,浓缩胶用5%的,因为浓缩胶的目的就是将所有的蛋白浓缩在同一起跑线上,然后一块进入分离胶分离.据蛋白大小定...
答案 你可以用12%的胶浓度,如果marker是fermentas家的SDS非预染marker(批号SM0431)的话,可以看到116kd 66.2kd 45kd 35kd 25kd 18.4kd 14.4kd,这样你的目的条带20kd就差不多在整块胶的中间相关推荐 1【请问】怎样根据蛋白质大小确定SDS-PAGE电泳分离胶的浓度?比如我的蛋白20几个kD,分离胶的浓度需要多大?反馈...
8. 上层胶中电泳出现“漏样”：• 原因：玻璃板与胶局部分离，上样缓冲液问题。• 解决方案：小心取下玻璃板，避免分离，上样时避免枪头插得太深。9. 泳道中心凹陷：• 原因：梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案：尽量在 25 分钟内插入梳子，避免长时间暴露。结语 通过详细了解SDS-PAGE凝胶...
蛋白质SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定?上样缓冲液的倍数如何确定? 答案 1,看目的蛋白的大小 一般actin以下的可以跑12胶 红线左右可以用12或10跑 几百的很大的用6的胶 小蛋白12的10的一般都能跑 如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看 2,看样品浓度多少,以及你想用几次 通......
(5 )用水冲洗一下浓缩胶,将其放入电泳槽中。(小玻璃板面向内,大玻璃板面向外。若只跑一块胶,那槽另一边要垫一块塑料板且有字的一面面向外。) (6) 测完蛋白含量后,计算含50ng蛋白的溶液体积即为上样量。取出上样样品至0.5ml离心管中,加入5×SDS上样缓冲液至终浓度为1×(上样总体积一般不超过15μl...
前置知识:SDS-PAGE电泳的凝胶主要分为浓缩胶和分离胶。浓缩胶:又称堆积胶,特点是凝胶浓度小、凝胶孔径较大。样品在浓缩胶上,会因为大孔径的凝胶迁移作用而被浓缩至同一条狭窄的区带上。从而使得样品在分离胶中能够高分辨率地分离。分离胶:又称电泳胶,可分为均一胶和梯度胶,特点是凝胶孔径小。通过选择合适的分离...
1、 SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳 2、 Acr:丙烯酰胺;配胶时用30%Acr(质量比Acr:Bis=29:1) 3、 Bis:甲叉双丙烯酰胺 4、 DDW:超轻水 5、 SDS:十二烷基硫酸/磺酸钠,阴离子去污剂(配胶时用10%) 6、 APS:过硫酸铵NH4S2O4配胶时用10% 7、 TEMED:四甲基乙二胺,促凝剂 8、 Tris-Hcl:3羟基氨基甲...
是个做凝胶电泳的新手，之前做了几次是用12%分离胶，5%浓缩胶，玻璃板是7.5cm左右的，跑完电泳后...
10%的分离胶：蒸馏水40.5ml；1.5Mtris 25ml（pH8.8）；10%SDS 1ml；acr/bis 33.25ml 20%的分离胶按此比例加倍即可。如果是小分子蛋白分离，建议最好用专门走小分子蛋白的胶（例如Tricine-SDS-PAGE等）