8. 上层胶中电泳出现“漏样”:• 原因:玻璃板与胶局部分离,上样缓冲液问题。• 解决方案:小心取下玻璃板,避免分离,上样时避免枪头插得太深。9. 泳道中心凹陷:• 原因:梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案:尽量在 25 分钟内插入梳子,避免长时间暴露。结语 通过详细了解SDS-PAGE凝胶...
答案 你可以用12%的胶浓度,如果marker是fermentas家的SDS非预染marker(批号SM0431)的话,可以看到116kd 66.2kd 45kd 35kd 25kd 18.4kd 14.4kd,这样你的目的条带20kd就差不多在整块胶的中间相关推荐 1【请问】怎样根据蛋白质大小确定SDS-PAGE电泳分离胶的浓度?比如我的蛋白20几个kD,分离胶的浓度需要多大?反馈...
SDS-PAGE凝胶电泳是浓缩胶缓冲液浓度,分离胶缓冲液浓度,样品缓冲液浓度,都是以什么为依据设计的? 答案 凝胶的浓度大小不同所对应的凝胶孔径大小也不同,浓度小的孔径大,浓度小的孔径小,一般分离胶用12%的,浓缩胶用5%的,因为浓缩胶的目的就是将所有的蛋白浓缩在同一起跑线上,然后一块进入分离胶分离.据蛋白大小定...
蛋白质SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定?上样缓冲液的倍数如何确定? 答案 1,看目的蛋白的大小 一般actin以下的可以跑12胶 红线左右可以用12或10跑 几百的很大的用6的胶 小蛋白12的10的一般都能跑 如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看 2,看样品浓度多少,以及你想用几次 通......
(5 )用水冲洗一下浓缩胶,将其放入电泳槽中。(小玻璃板面向内,大玻璃板面向外。若只跑一块胶,那槽另一边要垫一块塑料板且有字的一面面向外。) (6) 测完蛋白含量后,计算含50ng蛋白的溶液体积即为上样量。取出上样样品至0.5ml离心管中,加入5×SDS上样缓冲液至终浓度为1×(上样总体积一般不超过15μl...
1您好,关于【蛋白质SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定?上样缓冲液的倍数如何确定?你可不可以说清楚一点,我没做过蛋白电泳,不太清楚您说的什么,比如【几百的很大的用6的胶小蛋白12的10的一般都能跑】6的12的10的是指的什么 2 您好,关于【蛋白质SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定?上样缓冲...
聚丙烯酰胺凝胶浓度与蛋白质分离范围的关系: 聚丙烯酰胺凝胶浓度/% 蛋白质分离范围/kd 5 36—200 7.5 24—200 10 14—200 12.5 14—100 15 14—60 浓缩胶浓度低;分离胶浓度高于浓缩胶,一般不小于5%。 8KD的蛋白质可能就要用Tricine–SDS-PAGE系统,因为浓缩胶和分离胶浓度太大,电泳速度很忙,很可能引起电泳带...
怎样根据蛋白质大小确定SDS-PAGE电泳分离胶的浓度 按的是你丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量 与 胶总体积 的质量体积比(m/V)首先你要将上述药品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液(一般为30%,也是m/V)而10%,12%,16%你自然也就知道应该用多少的母液去配制了.相信如何配
是个做凝胶电泳的新手,之前做了几次是用12%分离胶,5%浓缩胶,玻璃板是7.5cm左右的,跑完电泳后...