以下是制作SDS-PAGE凝胶的基本配方和制胶步骤: 配方: 1. 1%丙烯酰胺(Acrylamide)溶液:将3.7g丙烯酰胺和60μl N,N'-亚甲基双丙烯酰胺溶解在0.5ml双蒸水中,搅拌均匀。 2. 2.5%BT(Bis-Tris)溶液:将0.1g BT和0.25ml TBE(三酸乙酸盐电泳缓冲液)混合均匀。 3. 10%过硫酸铵(AMS)溶液:将10μl AMS溶解在1...
3. 配制浓缩胶溶液:• 在干燥、干净的烧杯中按照配方表中的比例混合水、30%丙烯酰胺、0.5 M Tris-HCl (pH 6.8)、10% SDS、10% APS 和 TEMED。TEMED必须是最 后加入的成分。• 搅拌均匀后,立即倒入组装好的玻璃板中,确保均匀分布。• 用水或异丙醇覆盖凝胶表面,以保持均匀的表面,室温下凝固...
SDSPAGE凝胶配方及制胶SDS-PAGE凝胶配方及制胶 12%分离胶 体积 试剂 5ml 8ml 10ml 15ml 25ml 30ml 60ml 90ml 120ml 30%Acr-Bis(ml) 2 3.2 4 6 10 12 24 36 48 1.5M Tris-HCl PH8.8(ml) 1.25 2 2.5 3.75 6.25 7.5 15 22.5 30 ddH2O(ml) 1.65 2.64 3.3 4.95 8.25 9.9 19.8 29.7 39.6 10%...
3. SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用? 聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关;制胶缓冲液:浓缩胶选择pH6.7,分离胶选择pH8.9,选择tris-HCL系统,TEMED与AP:AP提供自由基,TEMED是催化剂,催化自由基引起的聚合反应进行;十二烷基硫酸钠(SDS):...
SDS-PAGE凝胶配方及制胶 12%分离胶 体积 试剂 5ml 8ml 10ml 15ml 25ml 30ml 60ml 90ml 120ml 30%Acr-Bis(ml) 2 3.2 4 6 10 12 24 36 48 1.5M Tris-HCl PH8.8(ml) 1.25 2 2.5 3.75 6.25 7.5 15 22.5 30 ddH2O(ml) 1.65 2.64 3.3 4.95 8.25 9.9 19.8 29.7 39.6 10%SDS(ul) 50 80 100 ...
【中文字幕】从制胶到电泳,大师姐手把手教你做Urea-PAGE电泳 730 -- 6:20 App 【熟肉】爱尔兰国立大学Western Blot教学-5,转膜 1132 1 5:31 App 【熟肉】爱尔兰国立大学Western Blot教学-4,考染 582 1 5:40 App 【熟肉】爱尔兰国立大学Western Blot教学-3,电泳 216 1 0:32 App Western Blot 常见...
一、胶溶液配方: 1. 30%(w/v)丙烯酰胺(acrylamide)溶液 - 在称量瓶中称取30g丙烯酰胺,并用蒸馏水调至100ml。搅拌溶解直至均匀。 -这是制备聚丙烯酰胺凝胶的基础溶液。 2. 响应稀释液(Response diluent) -用于稀释聚丙烯酰胺溶液以获得不同浓度的凝胶。 -可通过将聚丙烯酰胺溶液与水按1:3体积比混合来制备响应...
1.2SDS-PAGE凝胶配制 1.2.1配胶前准备 首先强调一下,一块好的胶是跑好蛋白的前提,所以这个环节也不容忽视。玻璃板的选择,一种是1.0毫米厚度的,另一种是1.5毫米的,这个厚度选择也是有讲究的,如果上样体积小于10微升,优先选1.0毫米,否则选1.5毫米的。原因是什么?答案在转膜部分揭晓。还有分离胶的浓度也要选择适...
: .SDS-PAG礙胶配方及制胶12%分离胶、试齐积5ml8ml10ml15m: .SDS-PAG礙胶配方及制胶12%分离胶、试齐积5ml8ml10ml15ml25ml30ml60ml90ml120ml30%Acr-Bis(ml)