细胞膜通透性：DTT能改变细胞膜通透性，促进外源分子如药物、基因载体的导入，在干细胞转染和药物筛选等方面发挥作用。抗氧化作用：在细胞培养过程中，DTT作为抗氧化剂，能减少细胞氧化应激，维持细胞健康状态。然而，DTT的使用需谨慎。其具有一定毒性，长期暴露或不当处理可能对实验人员造成伤害。此外，高浓度DTT可能干扰...
SDS-PAGE，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate -polyacrylamide gel electrophoresis），是一种常用的根据蛋白质分子量大小分离样本中蛋白质和多肽的技术。SDS-PAGE电泳的蛋白质迁移首先受SDS结合度的影响，其次还受缓冲体系，胶浓度，电压和电泳时间等影响。SDS-PAGE常用缓冲体系 Tris-Glycine体系：...
凝胶孔径可调节，根据被分离物的分子量选择合适的浓度，通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径；分辨率高，尤其在不连续凝胶电泳中，集浓缩、分子筛和电荷效应为一体。因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。SDS-PAGE电泳中各主要试剂的作用：1. β-巯基乙醇/二硫苏糖醇（DTT）β-巯基乙醇或二硫...
不含DTT的1×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温,临用前必须从1 mol/L DTT储存液中现用现加于上述缓冲液中。 (参照《分子克隆》二版P884) 本人将参照此配方,配成5×或6×,各成分浓度均扩大5倍。 另:Takara公司Catalog-N5上的5×SDS-PAGE Loading Buffer配方: 组分浓度: 配制量5 ml 配制方法 1.称量下列试...
在此过程中，PAGE技术根据蛋白质分子在电场中的迁移率差异，将蛋白质按照其电荷和分子量特性进行分离，形成若干条带。而SDS（十二烷基硫酸钠）作为一种阴离子表面活性剂，在还原剂DTT的协助下，能够破坏蛋白质的氢键和疏水键，并与蛋白质分子结合，形成短棒状的复合物。这种复合物的长度与蛋白质的分子量成正比，因此...
而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。其中SDS（十二烷基硫酸钠）是阴离子表面活性剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，从而破坏蛋白分子间的二、三级结构。而强还原剂如β-巯基乙醇，二硫苏糖醇（DTT）均能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶...
65mM DTT 100mg（使用时临时加入） ddH2O 6ml 样品溶解液：（100ml）终浓度为50 mmol/L Tris﹒HClpH=6.8（总体积的20%=20ml），2% SDS=2g，0.1% 溴酚蓝=0.1g，10% 甘油=10ml，补ddH2O到100ml 固定液（500ml）40%甲醇 10%乙酸 50%ddH2O 考染液（1L）G-250 1.2g，硫酸铵100g，...
非变性条件（天然 PAGE）电泳是在非变性（天然）条件下，使用可以维持天然蛋白构象、亚基相互作用和生物学活性的缓冲液系统进行的电泳。在天然电泳过程中，蛋白的分离基于荷质比。还原条件 使用还原剂，例如二硫苏糖醇 (DTT)、β-巯基乙醇 (β-ME)或盐酸三-(2-羧乙基)膦 (TCEP) 在还原条件下进行电泳。还原剂...
SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×,含DTT)5×1ml/10ml-20℃ 操作步骤(仅供参考): 1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×,含DTT)。水浴溶解后立即室温存放,尽 量避免长时间置于水浴中。使用完毕后应置于-20℃保存。 2.取适量的蛋白样品和SDS-PAGESampleLoadingBuffer(5×)按4:1混合,充分...
SDS-PAGE 操作标准 2010.06.28 王红勋 一,电泳相关溶液的配制: 1,30%丙稀酰胺混合溶液(100ml): 丙稀酰胺 双丙稀酰胺 29g(实际可以为 29.2g) 1g (实际可以为 0.8g) 用水溶解定容到 100ml,过滤,4 摄氏度保存一个月. 2,5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液: 5× Tris base 甘氨酸 10%SDS(m/V) dH2O 定容至 100...