后来思考过这个现象,怀疑是加水封时,水直接冲胶上或者加快了,导致上表面胶被稀释了?不过也没验证过...
解决办法:换一块新配置的胶试一试。 3)原因三:电压、电泳液、电极芯等问题 条带轻度拖尾、弥散现象,考虑电压、电泳液、电极芯等问题。参考marker,marker如果没问题,只有样本条带有问题,考虑跑胶的电压是否过高了,电泳液是否是新配置的,点击芯是否出现异常。 解决办法:调整合适电压(一般压缩胶90V,25min左右,分离胶...
SDS-PAGE常见问题与解决方法 一.凝胶问题 1. 胶的凝结不好,例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下,在分离胶的下部有波浪样的花纹,凝胶不均匀。 解决方法:加大TEMED 和过硫酸胺的量,使其凝结速度加快。同时洗干净玻璃板,防止有残留的胶干结在玻璃板上。 2. 胶不凝, 解决方法:温度较低时加大TEMED...
SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上面跑出来就看的清楚,不知道制胶的时候什么最影响条带深浅啊这两天又跑了好几次,没有一次成功,都是条带颜色浅。重新配制了分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液,APS...
将凝固的胶板装入电泳槽内,并在电泳槽内加入SDS-PAGE电泳缓冲液,把胶浸泡一段时间,时间越长越好(防止梳子与胶相连,或胶因湿度不够而萎缩);(6)点样时,再把梳子拔出来,拔时动作要轻,防止胶齿被拔断。二、SDS-PAGE电泳1、调胶:拔掉SDS胶上的梳子,并用小针调整齿的位置(使它们都平行)。2、点...
其他的条带都没问题,那就是你样品的问题,看看样品缓冲液是不是不合适?发自小木虫Android客户端 ...
这种SDS-PAGE 凝胶是已经配制好的,无需经过繁琐的制胶流程,拆了包装就可以直接使用的。Precast Gel预制胶不仅仅使电泳实验的时间缩短了30%,而且这种预制胶还采用了新型缓冲液配制技术,使电泳条带清晰而均匀,有效避免了SDS水解或PH值不稳定所造成的凝胶性能不稳定,条带不均匀等缺陷。#凝胶电泳# ...
其他的条带都没问题,那就是你样品的问题,看看样品缓冲液是不是不合适?发自小木虫Android客户端 ...
2)貌似胶的浓度是小了点。(不知道楼主所说的模糊,是指包括Marker在内的条带也模糊还是说,样品带上太模糊了)如果样品带太模糊,建议再稍微减少样品用量,煮沸后离心2-3min,吸取样品上清点样。 有时候,实验结果很容易出,但必须要仔细处理结果才可以! 个人意见。