我们可以看到各泳道重复性和颜色都一致,体现出蛋白提取和定量正确,可以继续试验。 这是血清血浆去高丰度后进行跑胶的胶图,图中可见去高丰度效果明显,各泳道重复性和颜色较为一致,蛋白提取和定量较为准确,可以继续试验。 图中条带有细微个体差异,但第五泳道出现无条带现象,说明取样或样本提取存在问题,不可继续试验,...
4.SDS的产品质量:许多厂商售有特级SDS,其纯度足以满足电泳需要。理论上任何一种产品都能获得可重复的结果,但若用一个厂家的SDS代替另一种SDS,多肽迁移的谱图变化甚大,故建议专门使用同一个品牌的 SDS。若分离的蛋白质需要从胶上洗脱下来测序。应按Hunkapiller等(1983...
用手夹住两块玻璃板,上提斜插板使其松开,然后取下玻璃胶室去掉密封用硅胶框,注意在上述过程中手始终给玻璃胶室一个夹紧力,再将玻璃胶室凹面朝里置入电泳槽,插入斜板,将缓冲液加至内槽玻璃凹面以上,外槽缓冲液加到距平板玻璃上沿3mm处即可,注意避免在电泳槽内出现气泡。 加样时可用加样器斜靠在提手边缘的凹...
SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统，与连续缓冲系统相比，能够有较高的分辨率。因此凝胶由上层的浓缩胶和下层的分离胶组成。上下两层胶的的区别在于Tris-HCl 的 pH 值和丙烯酰胺的浓度不同。图2：聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质分离示意图 上层的浓缩胶的pH为6.8，下层的分离胶的pH为8.8，上层为负极，下层为正极。
图 5 显示卡通凝胶，图 6 显示真实凝胶。请注意，实际条带大小相等，但每个条带内的蛋白质大小不同。图 5. 电流开启一段时间后然后关闭后 SDS PAGE 的顶视图。 凝胶有五个编号的泳道，其中五个不同的蛋白质样品（每种蛋白质的许多拷贝）被应用于凝胶。 （第 1 道，已知大小的分子量标准；第 2 道，三种不...
注入浓缩胶缓冲液,最后插入电泳梳,静置。在分离胶分离样品之前,浓缩胶会发挥高浓度的浓缩作用。浓缩原理如下图所示,根据甘氨酸离子与氯离子、蛋白质的泳动速度的差进行。 样品的制备 ※以MBL公司的样品制备为范例。 将样品缓冲液加入到样品中,用指尖轻弹使...
SDS-PAGE电泳实例图 注意事项 APS和TEMED是促凝的,根据温度加入的量是可以变动,一般不超过30%。 玻璃板一定要洗干净,否则制胶是会有气泡。 聚丙烯酰胺具有神经毒性,操作时注意安全,戴手套。(凝胶以后,聚丙烯酰胺毒性降低。) 凝胶的时间要严格控制好,一般在20-30min。
这种SDS-PAGE 凝胶是已经配制好的，无需经过繁琐的制胶流程，拆了包装就可以直接使用的。Precast Gel预制胶不仅仅使电泳实验的时间缩短了30%，而且这种预制胶还采用了新型缓冲液配制技术，使电泳条带清晰而均匀，有效避免了SDS水解或PH值不稳定所造成的凝胶性能不稳定，条带不均匀等缺陷。#凝胶电泳# ...
2.APS配制成10%溶液后,应分装保存在-20°C。将配置成的10%的APS溶液存放在4°C时易发生失效,保存时间较短,应尽量减少室温存放时间,以防失效。 3.TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖并4°C保存。另外凝胶凝聚的速度与温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED 的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度,配置胶时...
SDS-PAGE电泳胶图M 1 2 3 4 5 6 7 8 9KDa 10 11 M 12131415161718KDa 泳道与样品批号对应关系: 1-抗μ大样B15052800910-1B16-AgB13100813 2-抗μ小样B15060100911-107B120201D 3-HAV-抗μR1308271612-B20-1 4-HAV-抗μR1503044113-B20-2 5-C-IgM抗Μb1110130114-B20-3 6-HAV-AgQC15-B20-4 7...