SDS-PAGE回收蛋白的方法: 1.先要大量上样,配好分离和浓缩胶后不要插梳子,其他电泳条件同。 2.跑完胶后,将胶放入缓冲液中冲洗,KCl染色液染色后,可以看到一条明显的白色条带,就是你的目的蛋白(无目的蛋白的空白呈透明状),切下谜底带,将其用碾磨棒碾碎,在其中适当(尽量少加,不要超过500 ul/块胶)加入PBS或...
一、切割凝胶 切割凝胶是从SDS-PAGE凝胶中回收蛋白质的最常用方法之一。首先,使用刀片或类似工具将含有目标蛋白质的凝胶条带切割下来。然后,将切割下来的凝胶条带放入离心管中,加入适量的缓冲液(如PBS),在室温下孵育一段时间,使蛋白质从凝胶中释放出来。 二、破碎凝胶 破碎凝胶是另一种从SDS-PAGE凝胶中回收蛋白质...
蛋白量比较少的话用我的方法恐怕回收率会差些!我的方法是:先跑SDS-PAGE,然后用预冷的0.25M KCl染色(预先放在4度冰箱中),目的条带会出现白色条带,根据你已经跑过的考马斯亮蓝染色的位置可以判断哪条带是你的目的条带,如果蛋白浓度高的话,染1分钟就可以看到目的条带,蛋白浓度低的话,要染时间长一些,大概5-1...
先跑SDS-PAGE,然后用预冷的0.25M KCl染色(预先放在4度冰箱中),目的条带会出现白色条带,根据你已经跑过的考马斯亮蓝染色的位置可以判断哪条带是你的目的条带,如果蛋白浓度高的话,染1分钟就可以看到目的条带,蛋白浓度低的话,要染时间长一些,大概5-10分钟,如果太低,估计是看不到目的条带了。无法用此方法看到...
PAGE胶蛋白微量回收试剂盒 Micro Protein PAGE Recovery Kit 产品说明:十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量,而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一,随着蛋白质技术的微量化,有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等,本产品就是专门...
另一种方法:切下蛋白相对应PAGE胶,切碎,液氮中研磨至粉末状,加入8M尿素溶解后离心。回收效率比较高...
法傅 国平(南 京经 济学院食品科学 与工 程系,南京2 10 00 3 )关键 词蛋 白质回收s D s一 PA G E 作 为一 种常规的蛋白 质分 离及 分析手段, 具有简 便、迅速 的优点,但从凝 胶中回收 所需 蛋白质往往比较困难,主 要是 由于经考马期 亮蓝染 色及固定后,凝胶中 蛋白 质几 乎不可能 再...
作者 傅国平 摘要 SDS-PAGE中蛋白质回收方法傅国平(南京经济学院食品科学与工程系,南京210003)关键词蛋白质回收SDS-PAGE作为一种常规的蛋白质分离及分析手段,具有简便,迅速的优点,但从凝胶中回收所需蛋白质往往比较困难,主要是由于经考马期... 关键词 蛋白质回收 被引...
市面上有从SDS-PAGE胶内回收蛋白的试剂盒,不过没有用过,所以不太清楚效果,说明书上是说可以回收80...
SDS-PAGE只能对蛋白含量的多少进行粗略的估计,不能计算出其准确的值,若要jīng确计算某个蛋白质的含量,需要将蛋白胶条中包含的蛋白质回收,利用其它技术如质谱技术进行后续jīng确鉴定。 百泰派克生物科技使用Bio-Rad Mini-PROTEAN®Tetra凝胶系统以及Thermo公司zuì新推出的Obitrap FusionLumos质谱仪,结合nanoLC-MS/MS...