测定蛋白质分子量的方法有很多,SDS-PAGE是主要方法之一,也是实验室使用最普遍的一种。在SDS-PAGE中,已知分子量的标准蛋白质和未知样品同时电泳。染色后,根据标准蛋白质的相对迁移率和分子量的对数,可得到一条标准曲线,利用未知样品的相对迁移率可在标准曲线上求得其分子量。另外,SDS-PAGE法可分为还原电泳和非还原...
但如果要拍照,最起码要保证底色脱完全,要不然照片效果也不会好的。 广州如期生物技术有限公司成立于2016年,始终以探索科学、服务客户为己任;致力于为高校、科研院所、医院、制药企业提供全面、便捷、专业的技术服务和产品。技术方面我们专注于生物医学领域:公司拥有完善的技术服务平台,覆盖分子生物学,转录组学、代谢组学...
SDS-PAGE 操作流程——考染 1、准备溶液 30%聚丙烯酰胺溶液---30%(w/v)Acrylamide 【组分浓度】 各种组分名称 配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g) 30%Acr-Bis(29:1) 1000ml 100ml 29%Acrylamide( 丙烯酰 290g 29g 胺) 1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰 10g 1g 胺) 【配制方法】 将29 克丙烯...
1、SDS-PAGE操作流程考染1、准备溶液30%聚丙烯酰胺溶液-30%(w/v)Acrylamide 【组分浓度】各种组分名称配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g)30%Acr-Bis(29:1)1000ml100ml29%Acrylamide(丙烯酰胺)290g29g1%BIS(N,N-亚甲丙烯酰胺)10g1g【配制方法】将29克丙烯酰胺和1克N,N-亚甲丙烯酰胺溶于总体积...
SDS-PAGE电泳操作流程—含考染银染碘染.docx,1 SDS- 操作流程——考染 1、预备溶液 30% 30%聚丙烯酰胺溶液 30%〔w/v〕Acrylamide 【组分浓度】 各种组分名称 各种组分名称 30%Acr-Bis(29:1) 29%Acrylamide( 丙烯酰胺) 1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰 胺) 配制不同体积所需各成分的
SDS-PAGE SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量在5—250kDa之间的蛋白质。十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate ,SDS)和聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel ,PAG)组合使用可以消除结构和电荷的影响,从而仅根据分子量的差异来分离蛋白质。
PAGE),简称SDS电泳[1],主要用于蛋白质亚基分子量测定。SDS凝胶电泳是定量、比较和识别蛋白质的常用方法。具有经济、速度、重复的特点。它可以根据蛋白质的分子量来分离。 在现在的蛋白染色方法中,考马斯亮蓝染色法是最为常用的[2],虽然这种方法染色时间较长,但是其染色效果好,又比较简便,且银染法染色虽然灵敏度很...
3. dd H2O煮法脱色 PAGE胶染色完毕后,如果用一般的甲醇-乙酸脱色液进行脱色,一般至少需要2-3h,可利用蒸馏水煮的方法: (1). 先将500ml蒸馏水放在一个干净的烧杯中,在电炉上煮沸。 (2). 将染色好的胶用DD水冲净后放入煮沸的蒸馏水中,煮3～5min。
考马斯亮蓝染色液:称取1g考马斯亮蓝R-250溶于400mLddH2O中,加入450mL甲醇,100mL冰醋酸,最后加ddH2O定容至1L。 脱色液:甲醇100mL,冰醋酸100mL,ddH2O定容至1L。 实验流程: 1. 制胶:根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度。 SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6% 50-150kD 8% 30-90kD 10%...
sds-page电泳..2. **通用法**需用到支持膜(也称载片),步骤有原位自组装转化层技术结合双向变性的复合印迹探针标记一抗孵育以及最后成像检测等多个环节或过程 ,比较复杂一点的是需要进行杂交素猝照化学发光信号放大系统