1、SDS-PAGE操作流程考染1、准备溶液30%聚丙烯酰胺溶液-30%(w/v)Acrylamide 【组分浓度】各种组分名称配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g)30%Acr-Bis(29:1)1000ml100ml29%Acrylamide(丙烯酰胺)290g29g1%BIS(N,N-亚甲丙烯酰胺)10g1g【配制方法】将29克丙烯酰胺和1克N,N-亚甲丙烯酰胺溶于总体积...
SDS-PAGE 操作流程——碘染 1、 5%(W/V)BaCl2 染胶板 15min 或更长时间。 2、 水洗三次,每次 1min 3、 2.0g KI+1.3g I2+50mL H2O 混匀,染胶 15min。(先让 KI 溶于水,待完全溶解后加入 I2) 4、 自来水洗至背景色消失,不要长时间水洗。 6©...
SDS-PAGE电泳操作流程—含考染银染碘染.docx,1 SDS- 操作流程——考染 1、预备溶液 30% 30%聚丙烯酰胺溶液 30%〔w/v〕Acrylamide 【组分浓度】 各种组分名称 各种组分名称 30%Acr-Bis(29:1) 29%Acrylamide( 丙烯酰胺) 1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰 胺) 配制不同体积所需各成分的
银染实验中,在碱性条件下,银离子被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。蛋白电泳后的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶在甲醇溶液中浸泡后,水洗后用硝酸银溶液银染,再水洗后用碳酸钠甲醇水溶液显色。 与考染相比,银染具有灵敏度高的优点,很多做环境、植物、育种等方面的客户,都会做银染方面的实验。银染对于试剂的要求比较高...
在清洗之前胶被固定液和辅染液泡过后有大量有机溶剂残留与水不能很好的溶合在一起要用超纯水漂洗去多余的有几溶剂让胶看上去能和水的溶合在一起7525银染倒去超纯水将浸洗后的胶浸于银染液中置较强日光或类似光源下照射30分钟再于室内光线下放置20分钟7526清洗用超纯水清洗2次每次1分钟7527显色倒去超纯水将胶...
考染并不一定显色。如果你需要使用两种方法,看到一个条带,建议使用银染的方式,相对考染,会更加敏感...
因此,对PEG 修饰蛋白体系的SDS -PAGE 可先用考染或银染后再用碘化钡复染,便可在同一块凝胶上先后或同时观察到未修饰蛋白、修饰蛋白和游离PEG 的情况,简化了实验操作,方便了实验结果的比较分析。关键词 PEG 修饰 电泳 SDS -PAGE 碘化钡染色 复染 Application of Three Kinds of Staining Methods for ...
Marker:考染10μl上样,银染5μl上样。 加样:将浓缩胶聚合后拔出样品梳,将电极缓冲液注满电泳槽的前后槽,在加样孔中参加处理好的样品5μg〔银染〕或10μg以上〔考马氏亮蓝染色〕。 电泳:接通电源,先恒压100V开头电泳,至待检样品进入分别胶后将电压调至150V,直至溴酚兰至胶底部,电泳完毕。
因为考染有几个泳道看不清条带,于是进行银染,但银染的结果发现,除了原先考染可见的条带之外,几乎...
SDS_PAGE电泳技术分析蛋白质的研究