解决方案:调整样品浓度,选择合适的凝胶浓度,并优化电泳条件,如电压、时间和温度。🌬️ 电泳条带出现拖尾 可能原因:样品中存在高分子量物质或聚集体,凝胶浓度过低,电泳时间过长。 解决方案:进行样品预处理,如离心或过滤,去除高分子量物质或聚集体,提高凝胶浓度或缩短电泳时间。🌊 电泳条带出现弥散 可能原因:凝胶...
电流过大：过大的电流可能导致凝胶局部过热，进而引起条带弯曲。为了解决这个问题，可以尝试降低电泳电压以减少电流，或使用恒流电源来确保电流的稳定性。电泳时间过长：长时间的电泳也可能导致凝胶过热，从而引发条带弯曲。为了避免这种情况，可以适当缩短电泳时间，并密切关注溴酚蓝指示剂的位置，当其到达凝胶底部时及时...
在SDS-PAGE电泳中，凝胶的凝结是一个至关重要的步骤。通常，凝胶的凝固时间应控制在30分钟至1小时以内。若发现凝胶凝结速度过慢或根本无法凝固，这可能与引发聚合反应的试剂——TEMED和APS的状态有关。这两种试剂的用量不足或失效，都会导致凝胶凝固缓慢或失败。值得注意的是，APS（过硫酸铵）由于其不稳定性，容易...
17. 如何提高 SDS-PAGE 电泳分辨率 使聚丙烯酰胺的充分聚合,可以提高凝胶的分辨率. 建议做法:待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用.忌即配即用或冰箱放置,前者易导致凝固不 充分,后者可导致 SDS 结晶. 18. 电泳时间比正常要长 可能是因为凝胶缓冲系统和电级缓冲系统地 PH 选择错误,即缓冲系统地 PH ...
关于SDS-PAGE..关于SDS-PAGE 蛋白电泳的常见问题分析1. 关于凝胶的一些问题1. 胶的凝结不好,例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下,在分离胶的下部有波浪样的花纹,凝胶不均匀。解决方法:加大 TE
主页> 问答中心> 蛋白分析FAQ汇总> 为什么SDS-PAGE电泳后目标条带是模糊的? 造成这一结果的原因较多:1、凝胶的浓度不合适;2、蛋白质样品发生了降解。3、电泳时间过长或过短;4、电泳缓冲液重复使用多次或SDS配制太久;4、加样过多。 相关服务: SDS-PAGE蛋白质纯度分析 ...
4.提高SDS-PAGE电泳分辨率的途径？聚丙烯酰胺的充分聚合，可提高凝胶的分辨率。建议做法：待凝胶在室温凝固后，可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置，前者易导致凝固不充分，后者可导致SDS结晶。一般凝胶可在室温下保存4天，SDS可水解聚丙烯酰胺。一般常用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色三种染料，...
电泳时间过长或过短。溴酚蓝达到分离胶的底部即应该关闭电泳电源。 缓冲溶液、SDS都要新鲜配制。 避免加样过多,提高分辨率。小体积样品可给出窄带,加样体积根据样品浓度和凝胶厚度灵活掌握。一般上样体积为10-15uL(即2-10ug蛋白质)。 加热变性后的蛋白质样品要放置...
1、SDS PAGE 电泳 常见问题分析1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响?在SDS- PAG环连续电泳中,制胶缓冲液使用的是 Tris - HCL缓冲系统,浓缩 胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris 甘氨酸缓冲系统。在 浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳 动效率低;而CL离子却很高,两者...
SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一种常用的蛋白质分析方法,通过电泳可以将蛋白质按照分子量大小进行分离。如果在SDS-PAGE电泳后,脱色没有条带,可能有以下几种原因: 1. 样品处理问题: 可能是样品没有正确处理,或者蛋白质浓度太低,导致电泳后无法看到条带。在准备样品时,需要确保...