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可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。 2. 凝胶贮液:在通风橱中,称取丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯酰胺0.8g,加重蒸水溶解后,定容到100ml。过滤后置棕色瓶中,4℃保存,一般可放置1个月。 3. pH8.9分离胶缓冲液: Tris 36.3g ,加1mol/l HCl 48ml,加重蒸水80ml使其溶解,调pH8.9,定容至100ml, 4℃保存。
试剂名称10%的分离胶5%的浓缩胶acr/bis 30%/ml分离胶缓冲液(ph8.9)/ml浓缩胶缓冲液(ph6.8)10%sds/ml10%过硫酸铵/ul双蒸水/mltemed/ul3.33.7500.1504.0550.801.250.1252.925按上表各液加入混匀后配制成分离胶后,将凝胶液沿凝胶腔的长玻璃板的内面缓缓用滴管滴入,小心不要产生气泡。将胶液加到距短玻璃板...
本实验采用T=10%的胶,具体配方如下: 分离胶: 1号液 10mL 3号液 7.5 mL 4号液 0.3 mL 蒸馏水 12 mL 6号液 18L 5号液 180L 按顺序配制,加完6号液后暂时停下来,临用 9、时再加5号液,混匀后立即装入制胶槽,约60 min后就可以凝固。 3.2 制备电泳浓缩胶(T=0.38%) 浓缩胶: 1号液 1.33 mL 2...
九 封闭 PVDF膜用TBST淋洗,放入封闭液中 蛋白转膜组装顺序(sandwich制作) 组装顺序: 转膜夹黑色面(负极)-海绵垫-滤纸-胶- 膜 -滤纸-海绵垫-红色面(正极) 海绵 Cathode _ Anode + 滤纸 膜胶 滤纸 海绵 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质 【基本原理】 本实验用醋酸纤维薄膜作电泳支持物分离血清蛋白质。血清蛋白...
Tricine-SDS-PAGE是用于分离分子量在1-10kD的肽类用的。一、 试剂配制:1. Low Bis acrylamide(49.5% T, 3% C)Acylamide 48.0gBis 1.5gWater make up to 100ml2. High Bis acrylamide (
分离胶,立即覆一层重蒸水,大约20min后胶即可聚合;5按如下体积配制6%浓缩胶3.0ml,混匀;ddH2O1.0mol/LTris-HClpH=6.830%Acr-Bis2.0ml400ul600ul10%SDS10%APTEMED36ul24ul4ul6将上层重蒸水倾去,滤纸吸干,灌制浓缩胶,插入样品梳;7装好电泳系统,加入电极缓冲液,上样20μl;8稳压200V,溴酚蓝刚跑出分离胶...
100ml分离胶1.5mol/LpH8.8Tris-HCl缓冲液:将Trisg完全溶于50ml去离子水中,加加HCL调pH至8.8,加水定容至100ml。室温保存。 100ml积层胶:将Trisg完全溶于50ml去离子水中,加HCL调pH至6.8,加水定容至100ml。室温保存。 4、Tris-甘氨酸电泳缓冲液94g甘氨酸,加入50ml10%(w/v)SDS(电泳级)存储液(),用去离子水...
实验二十五 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳短玻璃片4u形硅胶框配制30ml不同浓度的分离胶液7凝胶贮液离胶缓冲溶液凝胶贮液浓缩胶缓冲溶液10sds溶液1temed溶液蒸馏水13所需试剂用量ml101010121215152020配制10ml3浓缩胶ml以上溶液混合后抽气10分钟10过硫酸铵溶液水用于隔绝空气使胶面平整 实验二十五 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 测定蛋白...