(1)清洗玻璃板 一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。 SDS-PAGE电泳仪器 (2)灌胶与上样 玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶)。根据蛋白分子量的不同配制不同浓度的分离胶,加入 T...
以下是SDS-PAGE电泳实验的详细步骤流程: 实验材料与试剂 蛋白样品 SDS-PAGE凝胶: 分离胶(Resolving gel)和浓缩胶(Stacking gel) SDS-PAGE缓冲液: 凝胶制备缓冲液、跑胶缓冲液(Running buffer) SDS样品缓冲液(Loading buffer): 通常含有SDS、甘油、溴酚蓝、DTT或β-巯基乙醇(还原剂)等成分。 Marker(蛋白分子量标...
1153 -- 4:29 App SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)凝胶配置操作流程 817 -- 1:17 App 蛋白表达之细菌接种和扩大培养操作流程 106 -- 1:58 App 蛋白免疫印迹wb实验--“封闭”操作流程(下) 1108 -- 1:48 App SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)蛋白电泳-染色、脱色前准备工作 357 -- 1:03 App 蛋白免疫...
4、待积层胶完全聚合后,小心拔出梳子,然后将玻璃板固定在电泳槽上。 5、样品处理:将样品加入等量的2×SDS上样缓冲液,100℃加热3-5min, 12000g离心1min,取上清作SDS-PAGE分析,同时将SDS低分子量蛋白质Marker作平行处理。 6、上样:取10μl诱导与未诱导的处理后的样品加入样品池中,并加入20μl低分子量蛋白M...
将凝固的胶板装入电泳槽内,并在电泳槽内加入SDS-PAGE电泳缓冲液,把胶浸泡一段时间,时间越长越好(防止梳子与胶相连,或胶因湿度不够而萎缩);(6)点样时,再把梳子拔出来,拔时动作要轻,防止胶齿被拔断。二、SDS-PAGE电泳1、调胶:拔掉SDS胶上的梳子,并用小针调整齿的位置(使它们都平行)。2、点...
配胶流程 SDS连续电泳缓冲液配方 SDS非连续电泳缓冲液配方 配好胶,电泳成功了一半 前置知识:SDS-PAGE电泳的凝胶主要分为浓缩胶和分离胶。浓缩胶:又称堆积胶,特点是凝胶浓度小、凝胶孔径较大。样品在浓缩胶上,会因为大孔径的凝胶迁移作用而被浓缩至同一条狭窄的区带上。从而使得样品在分离胶中能够高分辨率地分离。
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(完整版)SDS-PAGE电泳标准操作流程SDS-PAGE 电泳标准操作规程(网上) 3.程序: 3.1. 制胶 3.1.1 组装胶架 将洁净、无水的玻片对齐,形成空腔,插入塑料框的凹槽中,注意箭头向上,并确保下 端平齐。放于制胶架上夹紧,下端紧贴密封条。 3.1.2 分离胶的配置 3.1.2.1 10%分离胶配方如下表: 10%胶 蒸馏水 30%...
一、SDS-PAGE凝胶电泳操作流程 1. 准备电泳缓冲液:包括浓缩胶和分离胶的两个缓冲系统,分别为Tris-HCl和Tris-甘氨酸。 2. 配置凝胶:使用适当的浓度和厚度,并根据需要进行固定。 3. 上样:将待测样本添加到凝胶上样孔中,并确保样本与凝胶充分混合。
SDS-PAGE凝胶电泳实验流程 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE)是蛋白表达分析中应用最为广泛的一项技术,可用于检测蛋白质的表达情况和纯度等。依据样本中蛋白质的分子量差异,通过电泳凝胶,达到分离的目的。本文主要介绍SDS-PAGE凝胶电泳的实验原理、所需试剂以及实验步骤。