SDS-PAGE 是根据蛋白质的分子量进行分离的,但是蛋白质的形状也会影响其在凝胶中的迁移。一些非球形的蛋白质可能会在 SDS-PAGE 中迁移得比其实际分子量更慢,从而导致检测到的分子量大于预期。 4. 样品制备问题: 如果样品没有完全被 SDS 溶解,或者没有完全被 β-mercaptoethanol 或 DTT (dithiothreitol) 还原,那么...
1、分子量太大或者太小，测不准 2、不是纯蛋白，即存在翻译后修饰，测不准 3、蛋白电荷过强，比如...
大于预期 这个可能你胶配的不合适？我觉得浓缩胶一定得达到一厘米 然后也有可能你这个蛋白质存在某种翻译...
用SDS-PAGE评估相对分子量是需要严格条件的:1)蛋白质结构、氨基酸构成要接近,ROSALIND等的研究已经证明,不同的蛋白质结合SDS的能力是不同的,使用相同的条件处理不同类型的蛋白质,迁移偏差是必然的;2)蛋白质要处于相同的溶剂环境,有些样品处于高盐溶液,有些处于低盐环境,有时pH也有极大差异,即使经过相同的S...
接下来播放 自动连播 离子交换层析-根据等电点分离纯化蛋白质的方法 waki酱呐 42 0 等电点沉淀法——利用蛋白质等电点分离的方法 waki酱呐 35 0 等电点聚焦电泳IEF-根据等电点分离纯化蛋白质 waki酱呐 43 0 分子筛层析 凝胶过滤层析原理 waki酱呐 54 0 ...
实验七 SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定 一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合...
RT，求高人解释，SDS-PAGE不是本来剔除了电荷的影响么。另外，到底什么样的算脯氨酸“富集”？
p53就是一种因为富含脯氨酸而在SDS-PAGE上显示为更大分子量的蛋白，请见维基百科：http://en....
在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而消除了蛋白质原有的电荷差别,使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量,而与蛋白质所带的电荷无关,在...
SDS是一种阴离子表面活性剂,能打断氢键和疏水键,使分子去折叠,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。(2’) SDS按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白质分子间的天然的电荷差异。SDS最终使蛋白质变成具有高负电荷的线状分子。(2’) SDS-蛋白质复合物在...