SDS-PAGE SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量在5—250kDa之间的蛋白质。十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate ,SDS)和聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel ,PAG)组合使用可以消除结构和电荷的影响,从而仅根据分子量的差异来分离蛋白质。SDS-PAGE测定蛋白质分子...
•SDS-PAGE技术是指SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,是一种常用的分离和测定蛋白质相对分子量的方法。SDS-PAGE技术原理 •SDS-PAGE技术利用了SDS(十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的结合,将蛋白质变性并带负电荷,通过电泳分离大小不同的蛋白质,并利用染色和洗脱技术进行蛋白质相对分子量的测定。SDS-PAGE技术的应用...
SDS-PAGE是生物化学和分子生物学实验中常用 的技术,对于研究蛋白质的结构、功能和表达具 有重要意义。 2 通过该实验,可以了解蛋白质的相对分子量、等 电点等性质,有助于深入探究生命活动的分子机 制。 3 SDS-PAGE实验结果准确可靠,操作简便,可用 于大规模蛋白质组学研究,为生物医学、药物研 发等领域提供有力支...
掌握蛋白类药物SDS-PAGE法检测分子量和纯度的原理和方法。二、实验原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。聚丙烯酰胺凝胶是由一定量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合成的...
(1)标准蛋白质(低分子量Marker)蛋白质名称 分子量 兔磷酸化酶B 97400 牛血清白蛋白 66200 兔肌动蛋白 43000 牛碳酸肝酶 31000 胰蛋白酶抑制剂 20100 鸡蛋清溶菌酶 14400 待测蛋白质:牛血清白蛋白、人血清蛋白 (2)凝胶试剂 1)30%(W/V)丙烯酰胺30g丙烯酰胺,0.8g甲叉双丙烯酰胺,溶于100ml蒸馏水中,...
实验七 SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定 一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合...
用SDS-PAGE测定蛋白质的分子量,为什么有时和凝胶层析法所得结果有所不同?是否所有的蛋白质都能用SDS-PAGE测定其分子量?为什么?两种方法原理不同,有差异是正常的。如果差距较大,要仔细分析。一般凝胶层析是非变性的,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的,二硫键也被还原,所以是亚基(肽链)分子量。凝胶层析与分子形状有...
SDS-PAGE电泳是实验室常用的蛋白质分析方法之一,它可以用于测定蛋白质的分子量。 一、SDS-PAGE电泳原理 SDS-PAGE电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis)是一种在聚丙烯酰胺凝胶中进行的去洗涤剂电泳。蛋白质与SDS结合后,每个蛋白质分子都带有大量相同的负电荷,蛋白质的迁移速率主要取决于其大小,...
SDS最终使蛋白质变成具有高负电荷的线状分子。(2’) SDS-蛋白质复合物在PAGE凝胶中的电泳迁移率不再受到蛋白质原有电荷的影响,而主要取决于蛋白质的分子量大小,因此利用SDS-PAGE凝胶电泳能够测定蛋白质分子量。(3’)反馈 收藏