SDS-PAGE的染色剂和洗脱剂是什么 相关知识点: 试题来源: 解析 考马斯亮蓝 R250染液:1L=1g考马斯亮蓝 R250+水650ml+异丙醇250ml+冰醋酸100ml 脱色液:1L=水850ml+乙醇50ml+冰醋酸100ml 分析总结。 1l1g考马斯亮蓝r250水650ml异丙醇250ml冰醋酸100ml...
凝胶放在染色液中染色,该步骤在摇匀板上完成 转到脱色液中,脱色4-6小时,或者过夜,脱色液要换3-4次 脱色完成后利用凝胶成像系统记录蛋白条带信息 注意使其平整,避免产生气泡 如果发现胶的位置不合适可以调整 点击下一步获取照片 丙烯酰胺有毒,操作过程中要小心...
考马斯亮蓝染色液 1000 mL: 先称取考马斯亮蓝R250 1.0 g 于1000 mL试剂瓶内,加入甲醇450mL溶解,再加冰醋酸100 mL和双蒸水450 mL至大约1000 mL。室温可放置12个月以上。染色液可倒入专用的回收试剂瓶,届时加入适量甲醇、考马斯亮蓝和大约10 g/L的三氯...
(1) 染色液和脱色液重复次数不一定的,可以根据他们的着染能力和脱色能力考虑是否换新的.夏季甲醇挥发快,用3~5次应该可以用.当然,用时要加盖. (2)脱色时注意防止挥发,脱色液可以用活性碳处理后反复用多次的. (3)脱色液反复使用,用两三次后用活性炭“包被”的滤纸过滤,滤纸可反复使用。脱色液反复使用后,胶有...
染色完成后,回收染色液,用纯净水冲洗凝胶2-3次,然后放入脱色槽中,加入脱色液进行脱色,直到没有背景色为止。 Tips:脱色时可以在脱色槽侧面放一块吸水纸,脱色更干净。 如果着急看结果,可以适当加热后脱色,十分钟出结果。 9照胶和分析 SDS-PAGE电泳结果
考马斯亮蓝染色液:称取1g考马斯亮蓝R-250溶于400mLddH2O中,加入450mL甲醇,100mL冰醋酸,最后加ddH2O定容至1L。 脱色液:甲醇100mL,冰醋酸100mL,ddH2O定容至1L。 实验流程: 1. 制胶:根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度。 SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6% 50-150kD 8% 30-90kD 10%...
电泳时间通常为1-2小时,取决于凝胶大小和蛋白质分子量。 四、染色与脱色 染色 电泳结束后,小心取出凝胶,放入考马斯亮蓝染色液中,染色30-60分钟(根据需要调整时间)。 脱色 将凝胶转移到脱色液中,轻轻摇动脱色,直到蛋白条带清晰可见(通常需要2-3次更换脱色液,持续几小时到过夜)。
SDS-PAGE电泳染色脱色时间较长,如果急于看结果,可以采用以下方法: 1.将胶转移到适当大小的玻璃平皿中,倒入考马斯亮蓝染色液,液面能覆盖胶面即可,然后用另一平皿盖住表面,放入微波炉中加热,一见沸腾,立即停止,然后放在摇床上摇5分钟左右即可,这样的染色效果很好。 2.脱色也可采取相同的方法,只不过把考马斯亮蓝...
脱色液。他是把颜色能够更好的清洁干净洗掉的一种洗剂产品。染色液它是一种颜料是为了上色用的,他们功能。是完全相反的,这就是他们的区别。00分享举报您可能感兴趣的内容广告 WB蛋白转印硝酸纤维素膜nc膜-默克生命科学 默克提供硝酸纤维素膜nc膜 0.45μmPVDF膜;小分子,低丰度蛋白硝酸纤维素膜nc膜荧光WB 硝酸纤...
6. 脱色 将胶体从染色液中取出,放入脱色液中,多次脱色至背景清晰 凝胶可保存于双蒸水中,用相机拍摄结果。 三、讨论总结 1. 影响蛋白电泳迁移率的三个因素 形状——所有的蛋白质经还原剂处理后都处于一级结构,因此形状不影响蛋白质的分离 电荷——经过SDS处理后所有蛋白都带负电荷,因此电荷不影响分离 ...