SDS-PAGE 试剂配制 凝胶脱色染色方法:溶液1:无水乙醇250mL,冰醋酸50mL,水200mL;溶液2:无水乙醇50mL,冰醋酸37.5mL,水437.5mL;溶液3:0.25g考马斯亮蓝R-250 溶于100mL 95%乙醇中,滤纸过滤,待用。电泳结束,取出胶放在胶盒中,加约50mL溶液1,微波炉加热1min,摇床摇10-20nin;倒掉溶液1,加入溶液...
考马斯亮蓝脱色液 10 L: 于10 L洁净塑料桶内装入工业乙醇2 L,冰醋酸500 mL,加入去离子水至10 L,混匀,室温可放置12个月以上。 蛋白电泳凝胶的快速染色和脱色: 凝胶的染色和脱色于合适体积的塑料盒中进行。电泳后的凝胶加入染色液(以刚没过凝胶即可),于...
2、按照上面配方制SDS-PAGE凝胶,安装好电泳仪,在槽中加入电极缓冲液。 3、按一定顺序在加样孔中加入样品。 4、打开电源将电压调到80v,待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 5、将凝胶小心取下放入容器中,加入染色液,用摇床摇2-3h 6、待条带清晰后倒出染色液,加入脱色液过夜 7、将脱色...
0.2g考马斯亮蓝R250+84mL 95,乙醇+20mL冰醋酸,定容至200mL,过滤备用 考马斯亮蓝脱色液(甲醇脱色液效果好,但有毒性) 甲醇100 mL 冰醋酸 100 mL ddHO 800 mL 2 医用酒精:冰醋酸:水=4.5:0.5:5(V:V:V) SDS-PAGE所需溶液: A液——30,丙稀酰胺(W/V):丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去...
1. 染色液可回收利用;室温保存即可;甲醇可以用乙醇代替。 2.其它脱色液: (1)用水脱色,但效果非常不好,建议不要用。 (2)脱色液也可以用0.5%mol/l的氯化钠,没有气味,脱色效果也不错。但胶可能会胀的厉害! (3) 20%的甲醇和0.1M的tis-磷酸(PH6.5) ...
1.0g 0.4g 异丙醇 250ml 100ml 冰醋酸 100ml 40ml 去离子水 650ml 260ml 考马斯亮蓝染色脱色液 【组分浓度】10%(v/v)醋酸,5%(v/v)乙醇 搅拌溶解,可用甲醇替代 搅拌均匀 搅拌均匀,滤纸除去颗粒物,室温保存 名称 用量 备注 冰醋酸 100ml 乙醇 50ml 去离子水 850ml 充分混匀后使用©...
配制sds-page 脱色液:250ml 95%乙醇+80ml冰醋酸,定容到1000ml,即可.或者 100ml 95%乙醇+50ml冰醋酸,定容到1000ml,即可.
8)2 SDS电泳上样缓冲液:1M Tris-HCl(pH,-巯基乙醇,SDS 0.6g,甘油mL,%溴酚兰mL,ddH 2O; 9)考xxxx染色液:考xxxxR 2501.25g,甲醇225 mL,冰醋酸50 mL,ddH 2O225mL; 10)脱色液:甲醇、冰醋酸、ddH 2O以2∶1∶7配制而成; 1 / 4 11)分别胶%):ddH 2O 4mL,30%贮备胶5 mL,4分别胶缓冲液3mL,...
考马斯亮蓝染色液:称取1g考马斯亮蓝R-250溶于400mLddH2O中,加入450mL甲醇,100mL冰醋酸,最后加ddH2O定容至1L。 脱色液:甲醇100mL,冰醋酸100mL,ddH2O定容至1L。 实验流程: 1. 制胶:根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度。 SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6% 50-150kD 8% 30-90kD 10%...