答案 4个不连续:凝胶浓度(孔径)、pH、离子成分、电位梯度(浓缩效应).相关推荐 1为什么SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳称为不连续电泳 反馈 收藏
所谓“不连续”是指电泳体系由两种或两种以上的缓冲液、pH和凝胶孔径等所组成。 SDS PAGE凝胶配制 SDSPAGE凝胶电泳是最常用的定性分析蛋白质的电泳方法,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。 制备凝胶时首先要根据待分离样品的情况选择适当的分离胶浓度,例如通常使用的15%的聚丙烯酰胺凝胶的分离范围是104～105...
在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCl缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而Cl离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度...
二、SDS-PAGE的浓缩效应采用电泳基质的不连续体系（即凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、pH的不连续性及电位梯度的不连续性），使样品在不连续的两相间积聚浓缩成很薄的起始区带（厚度为10-2cm），然后再进行电泳分离。这里仅以高pH的不连续系统为例说明其基本原理。此系统是一个高pH的碱性系统，或...
SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统，于连续缓冲系统相比，能够有较高的分辨率。 浓缩胶的作用是有堆积...
【SDS-PAGE电泳】不连续SDS-PAGE电泳发布日期:[2009-12-7] 共阅[735]次 不连续SDS-PAGE 一、原理及目的(略) 二、试剂 1、30%丙烯酰胺贮存液:29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于100ml热水中,验证其pH值不大于7.0。置棕色瓶中,4℃保存。 2、1.5mol/L Tris(pH8.8)溶液 3、10% SDS溶液 4、...
SDS非连续电泳缓冲液配方 配好胶,电泳成功了一半 前置知识:SDS-PAGE电泳的凝胶主要分为浓缩胶和分离胶。浓缩胶:又称堆积胶,特点是凝胶浓度小、凝胶孔径较大。样品在浓缩胶上,会因为大孔径的凝胶迁移作用而被浓缩至同一条狭窄的区带上。从而使得样品在分离胶中能够高分辨率地分离。分离胶:又称电泳胶,可分为均一...
不连续SDS-PAGE：①凝胶孔径的不连续；②缓冲液离子组成及各层凝胶pH的不连续；③在电场中形成的电位梯度的不连续。产生三种物理效应：①电荷效应：②分子筛效应:③浓缩效应:浓缩胶的作用机理 •浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩...
2、聚丙烯酰胺凝胶电泳：以聚丙烯酰胺凝胶为支持物，一般制成凝胶柱或凝胶板，凝胶是由相连的两部分组成（小的部分是浓缩胶，大的部分为分离胶），这两部分凝胶的浓度、缓冲液组分和离子强度、ph以及电场强度都是不同的，即不连续性。电泳时样品首先在不连续的两相间积聚浓缩而成很薄的起始区带，然后再...
在SDS-PAGE电泳中，蛋白质通过凝胶按相对分子质量大小分离，主要受到电荷和凝胶孔隙大小的影响。SDS（十二烷基硫酸钠）作为表面活性剂与蛋白质结合，使其带负电荷，SDS与蛋白质的比例为1:1，使得电荷密度与分子量成正比。凝胶孔隙大小可通过调节聚丙烯酰胺浓度调整，低浓度凝胶适合分离大分子，高浓度则适合小...