RT-PCR: 以RT反应产物cDNA分子为模板进行特异性PCR扩增的过程,是检测基因表达最常用的方法。 RT反应试剂 1 引物: Oligo dT 16,寡聚胸甘酸16个,要求mRNA有poly A 尾巴 mRNA 1-4% 2 逆转录酶 : 鼠白血病病毒莫洛尼株 MMLV 、鸟类成髓细胞瘤病毒 AMV 3 RT反应缓冲液:常用5×浓度。 4 底物:即四种dNTP的...
我国公布的禁止进境检疫的有害生物烟草环斑病毒(TRSV)是RNA病毒。检疫部门取烟草叶片进行该病毒的诊断和检测,将待测样品利用RTPCR技术(逆转录PCR,具有灵敏度高、特异性强的优势)扩增样品。下图1是RTPCR技术的过程示意图,图2是PCR扩增产物的电泳图。请回答下列问题:(1) 图1过程①表示利用RNA获得cDNA,该过程需要_...
RT反应：在逆转录酶作用下，以mRNA为模板合成cDNA（complementaryDNA）分子的过程。PCR反应：PCR扩增是模拟天然DNA复制过程，利用DNA聚合酶在体外扩增一对引物之间特异性DNA片段的方法。其主要热循环过程可分为三个步骤：（1）变性；（2）退火；（3）延伸。RT-PCR:以RT反应产物cDNA分子为模板进行特异性PCR扩增的过程...