通过RT-qPCR进行的基因表达分析广泛用于生物学研究的许多领域,包括对非生物和生物胁迫的反应。即使在RNA样本量有限的情况下,RT-qPCR也具有高灵敏度、特异性和宽动态范围。要想获得可靠的结果,需要适当的标准化策略。内部控制基因 (Internal Control Genes,ICG) 的标准化是最流行的一种。一个理想的内参基因应该在不同...
qPCR实验通常需要设置三个生物学重复,对于不同的实验处理,还要有3个技术重复。 ● 生物学重复:同一处理下的不同植株、细胞系、动物个体等。 ● 技术重复:同一实验材料所包含的复孔。 实验对照是实验的监控系统,用以监测实验是否存在异常。在qPCR实验中,实验对照通常有NTC对照和NRT对照。 ● NTC:无模板对照,用来...
分享自己关于qPCR(RT-PCR)数据相对定量的分析方法与经验(相对定量,目的基因,对照组,基因) qPCR的数据相对定量分析其实很简单。我做了很多的qPCR实验,也看了很多的资料,包括Nature protocol, AB官方的分析教程,MIQE,甚至包括一些商业化软件使用的教程及教程里面记述的原理。 我在这里跟大家分享一下自己的经验,最常用,...
RT-qPCR相对定量，NTC无模板对照怎么设置，是每个基因（内参和目标基因）都做无模板对照，还是只需要做...