RT-QPCR 是 Q-PCR 的一种,应用广泛,包括: 扩增特异性分析 基因定量分析 基因分型 SNP 分析 常用方法: SYBR Green I 非特异性方法 Taqman 水解探针特异性方法 二、SYBR Green I 非特异性方法 SYBR Green I 染料 与双链 DNA 结合,荧光信号强度与双链 DNA数量相关。 实验前准备 试剂与耗材: 特异性 PCR 引...
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse transcription(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。与RT-PCR一样,RT-qPCR定量分析R...
RT—PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT及基因特异性引物中的一种...
RT-qPCR已被用于多种分子生物学的应用中,其中包括基因表达分析、RNA干扰验证、微阵列验证、病原体检测、基因测试和疾病研究(4)。 希望这篇“P文”能对您的实验有一定帮助,让您成为一个合格的“P人”。最后,大家如果不想在PCR鉴定上浪费时间,南模生物也可提供大小鼠基因型鉴定服务,更多详情请联系我们。
来自德国MB公司的RNA病毒检测试剂盒(RT-qPCR法)(英文名:ConviFlex™RT-Taq mix)用于定性检测和分析RNA病毒和RNA分子,特别适合检测新冠病毒等此类病毒。缔一生物作为MB公司国内总代理,为大家介绍RNA病毒检测(RT-qPCR法)试剂的操作步骤。 步骤1. 冻干粉ConviFlex™RT-Taq Mix,离心5秒钟,然后加入260μl复溶...
分子克隆可以说是研究分子生物的必备技能，在学习分子克隆的过程中，想必各位小伙伴都会接触到PCR、RT-PCR和qPCR这几个词，这三者具体有什么区别呢？本期小编将从定义和技术原理来介绍这三种技术。首先来讲讲极大地推进了生命科学研究进程的聚合酶链反应，也就是PCR（polymerase chainreaction）技术，这是一种使用DNA...
探针是荧光标记的，5'端有荧光标签（F），3'端有荧光淬灭标签（Q）。聚合酶在延伸引物时，遇到探针后开始降解，释放出荧光。整个过程通过荧光仪检测，荧光强度随每轮扩增增加，代表复制DNA链的数量。本期内容介绍了PCR、RT-PCR和qPCR的技术原理，下期将详细讲解PCR技术的实验步骤和注意事项，感兴趣的...
可冻干一步法 RT-qPCR预混液是一种无甘油、即用型的混合液,含有Taq聚合酶,反应缓冲 液,dNTP,氯化镁,冻干赋形剂,以及单独的逆转录酶和稀释缓冲液。这个混合液是开发常温稳定、可室温运输储存、多重RT-qPCR的理想选择, 并且适合于需要快速再水化的高通量自动化平台。迈迪安开发出一系列不含甘油并使用专门冻干辅料...