1 加样误差比较大；2 复孔最好三个以上；3 部分引物需要重新设计。看溶解曲线最后的那个峰值，尽管你的引物最后的峰值都不很尖，但基本上峰值与基线的距离比较大就可以了。基本上在扩增过程中没有出现S形曲线的引物可能都要换掉。4 模板可能不好，因为你的内参与靶基因的CT值几近相等。一般来讲。内参的CT值应该在10以上到20左右，比靶基因要...
PCR循环中每个步骤所需的时间取决于所扩增片段的长度。循环次数一般为20-45次,PCR扩增效率呈S形曲线状,平台出现的早晚与模板初始量有关,另外还与许多因素有关:如引物二聚体和反应亚产物(焦磷酸等)的产生抑制了扩增反应、反应体系中各组分的消耗和变性、引物和产物间的竞争(反应产物之间杂交,反应产物与模板的杂交甚...
我刚开始做RT-PCR，用的是仪器是7500，荧光燃料法，做标线时扩增效率总是在一百十几。求解决方法。
做了快一个月了，扩增效率就是上不去，Tm值，体系，稀释比都改了，怎么做都只有50%-60%，相关性0...
如果样本A的模板数是样本B的模板数的8倍,如果它们RT-PCR的扩增效率为1,那么理论上两个反应达到荧光阈值所需要的循环次数的关系是A.A比B小4B.A比B小3C.A比B大2D.A比B大3E.A比B大4的答案是什么.用刷刷题APP,拍照搜索答疑.刷刷题(shuashuati.com)是专业的大学职业搜题找答案,刷
如果样本A的模板数是样本B的模板数的2倍,如果它们RT-PCR的扩增效率为1,那么两个反应达到荧光阈值所需要的循环次数的关系是A.A比B大2B.A比B小2C.A比B大1D.A比B小1E.A等于B的答案是什么.用刷刷题APP,拍照搜索答疑.刷刷题(shuashuati.com)是专业的大学职业搜题找答案,刷题练习
当今发展出各色各样的PCR扩增技术,各色各样的高温聚合酶,就是来解决PCR扩增中遇到的扩不出,扩增效率低的问题。如槽式PCR就是扩增那些拷贝数很低的基因片段。 有些重复片段的扩增, GC含量高的片段,非要采用特殊扩增手段才能扩增出了。引物扩增不出,主要是下列两种情况比较常见:RT-PCR。请注意,很多基因通过常规RT...