逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。作用 RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极...
RT-PCR就是逆转录PCR(Reverse transcription PCR)或称为反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR),是以RNA为材料应用于PCR扩增中的一种实验方法。首先通过逆转录酶将总RNA或信使RNA(mRNA)转录成互补DNA(cDNA)。其次Taq DNA聚合酶以cDNA为模板进行qPCR扩增。RT-PCR已...
RT- PCR,英文名为 Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,即逆转录PCR,是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。这项技术使用的逆转录酶来自逆转录病毒,是一种能按照碱基互补配对原则,以脱氧核糖核苷酸为底物,以寡居dT为引物,把mRNA转换成相应DNA的酶,由于该酶的效果与中心法则(DNA...
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的转录产物;(2)获取目的基因;(3)合成cDNA探针;(4)构建RNA高效转录系统。 实验方法原理 逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA...
逆转录聚合酶链反应 RT-PCR 和 qPCR 之间的密切关联导致将术语 qPCR 用于表示 RT-PCR 的转喻。这种使用可能会令人困惑,因为 RT-PCR 可以在没有 qPCR 的情况下使用,例如用于实现分子克隆、测序或 RNA 的简单检测。相反,qPCR 可以在没有 RT-PCR 的情况下使用,例如量化特定 DNA 片段 的拷贝数。
5.实验五_RT-PCR(逆转录)实验五 RT-PCR---逆转录 一实验目的 掌握逆转录的基本原理和方法。逆转录也称反转录,是某些生物(如鸡的肉瘤病毒、HIV等)的特殊复制方式。它们的遗传信息载体是RNA而不是DNA。因此,在感染细胞时,首先经过逆转录作用成为双链DNA,才能整合到宿主基因组中去。这个过程由逆转录酶催化,...
逆转录PCR,或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形.在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增. 由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成.随后,DNA的另一条链通过脱氧...
新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)法是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。如图是RT-PCR两步法的过程图,在PCR扩增时加入能与目的基因(新冠病毒的核壳蛋白N基因)结合的荧光探针。目的基因合成越多,荧光信号越强,回答下列问题。(1...
解析 以mRNA为原始模板进行的PCR。先将mRNA逆转录生成cDNA,然后再进行PCR扩增。逆转录反应所用引物为寡聚胸腺嘧啶核苷酸,合成出cDNA第一链,再采用特异引物,以cDNA第一链为模板进行PCR扩增,最后扩增到大量的目的DNA片段。 暂无解析结果一 题目 反转录PCR(Reverse transcription PCR, RT-PCR) 答案 反转录PCR 是将RNA...