实时定量反转录聚合酶链式反应(Real-Time Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chn Reaction,简称实时定量RT-PCR)是一种在DNA扩增过程中,通过荧光信号实时监测反应产物量的变化,从而得到起始模板量的分析方法。这种技术结合了反转录(RT)和聚合酶链式反应(PCR)两个过程,使得RNA模板也能进行定量分析。 实时定量RT...
1. 根据正态性、方差齐性和样本量等因素选择合适的统计分析方法。2. 逆转录PCR（reverse transcription PCR），又称反转录PCR（RT-PCR），是PCR技术的一种重要应用形式。在此过程中，RNA模板被逆转录成cDNA，随后通过PCR进行扩增。3. 逆转录过程涉及将RNA单链转录成cDNA，这一步骤由逆转录酶完成。随...
摘要:为建立鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法,对DTMUV的NS5基因设计特异性引物和MGB探针,使用RT-PCR扩增NS5基因并将其连接到pEASY®-T1载体上构建重组质粒,提取阳性重组质粒作为qRT-PCR阳性模板绘制...
通过特定的实时RT-PCR确定所有样品中病毒RNA的浓度,并用体外转录RNA标准确定病毒载量。结果显示,被测试的病毒或病毒制品均未显示出与任何测定法的反应性。 表2:用2019年新型冠状病毒E和RdRp基因检测法对临床样品来源的已知呼吸道病毒、细菌以及细胞培养制剂进行交叉反应检测(n = 310) 03 用其它含有各种病毒的呼吸道...
该方法的建立是基于OIE所认可的,以检测FMDV 3D编码区域为基础的实时荧光定量RT-PCR方法。目前,该研究成果以发表至《Journal of VirologicalMethods》杂志,题为:Developmentofa droplet digital RT-PCR for the quantification of foot-and-mouth virus RNA。
师姐详解从PCR到qPCR实验流程(详解) 实时定量PCR(RT-qPCR)是一种利用荧光化学物质在每个聚合酶链式反应(PCR)循环后测量产物总量的方法,广泛应用于特定DNA序列的定量分析。以下是RT-qPCR的实验操作流程: 🔬 实验原理:Real-time PCR通过荧光信号实时监测PCR进程。在指数扩增阶段,模板的Ct值与起始拷贝数之间存在线性...
方法利用 aqMan 探针 建立实时荧光定量 R -PCR 方法 通过对登革热病毒 RNA 定量外标准品的定量分析 优化反应体系 检测 aqMan 探针实时荧光定量 R -PCR 方法的灵敏度、特异性和重复性。 结果方法检测灵敏度可达 1×1 3copies mL 特异性及重复性良好 对同一样品进行 5 次重复检测 其循环阈值的平该均标准偏差...
摘要:为快速、准确、灵敏检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),以PEDV N基因为靶标设计引物,建立了一种PEDV SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法。该方法最低可以检测到10个拷贝的病毒核酸,与猪传染性胃肠炎...
为快速、准确定量绵羊PrP基因的mRNA,建立了绵羊PrP基因实时荧光定量聚合酶链反应检测方法。根据已报道的绵羊PrP基因序列,设计合成引物;采用RT-PCR方法扩增目的片段;构建标准重组质粒制备标准曲线,用于样品检测。结果发现,中枢神经系统组织PrP基因的表达量(copies/ng总RNA,39420)比外周组织(为7845)的高;在中枢神经系统中,...