RT-qPCR反应由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成,技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物,重复循环变性-退火-延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百...
microRNA(miRNA)是一类长度在 22nt 左右的小 RNA 分子,它并不编码 蛋白质,因此 miRNA 与 siRNA 和 circRNA 等小 RNA 分子一样,也是一种非编 码 RNA。 6miRNA QPCR 检测 在做qPCR的过程中,常常会出现各种问题,让初学者一筹莫展,要debug,首先要明白bug是怎么出现的,才能对症下药。 7流式检测细胞周期 PI法...
qPCR实质上是一种PCR扩增反应,但它与普通PCR有所不同。普通PCR是将的得到的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,通过核酸染料染色并借助紫外凝胶成像仪进行观察,最后通过终产物进行定性或者半定量分析;qPCR是在反应体系中引入荧光基团(染料或者探针),进而对qPCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应的过程,结合相应的qPCR仪自...
RT-PCR 就是逆转录 PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录 PCR (reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应 (PCR) 的一种广泛应用的变形。 在RT-PCR 中,一条RNA链被逆转录成为互补 DNA,再以此为模板通过 PCR 进行 DNA...
这份实验protocol包含了外泌体抽提、电镜、示踪,照着做,就不会出错! 点击领【实验必学protocol-一周入门pcr】+实验资料合集 细胞交互 入门、初级、中阶实验protocol 科研人习惯把WB叫做「玄学」,因为真的很容易出现问题!被WB折磨的小伙伴们快看过来,我们为你准备了超级详细的WB实验操作流程,更有PCR引物设计、RNA...
普通PCR即第一代PCR技术,以双链DNA为模板,以dNTP为底物进行扩增,特异性地扩增双链DNA的过程,然后采用琼脂糖凝胶电泳对产物进行定性分析。(2)实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR)实时荧光定量PCR,即第二代PCR技术,是指在整个扩增的过程中,引入了荧光染料或者荧光基团,随着DNA数量...
qPCR探针设计的一般原则有这5个,看看你都了解吗?#qPCR#科研实验 205 -- 0:20 App 引物退火后不能连接到载体上是什么问题?#PCR 213 -- 0:37 App 举例说明如何测定引物的OD值,看完视频看看你学会了吗?#PCR#引物设计 298 -- 0:47 App 怎么样操作可以尽量避免血清沉淀的出现?这很基础的知识,可能你都不...
翌圣生物作为研发qPCR试剂的资深厂家,匠心研发了一款高性能qPCR预混液——Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix,可以一次性解决上述实验烦恼。其中Universal ROX替代了传统ROX,弥补不同仪器平台的光程差,实现了适合所有qPCR仪器。另外,产品采用抗体法修饰,同时配方添加了基因扩增的促进因子,产品的扩...
pcr 常用就是扩基因,提完rna后反转啊,那你扩来基因用做什么就需要你来看了。菌落PCR,也是扩,放大数目,好验证。qPCR是荧光染料,做定量,一般是看表达,就是基因的表达情况,基因层面 rtPCR是半定量,相对上面的定量来说没有完全量化,相当于是质化,也能看出问题 western 是做蛋白的 ...
qPCR 特指 Quantitative Real-time PCR 的缩写(或者:Real-Time PCR;注意:不是RT-PCR),翻译成...