youtube【科普教程】RT-qPCR(实时荧光定量PCR)的数据计算(上), 视频播放量 1488、弹幕量 0、点赞数 10、投硬币枚数 0、收藏人数 22、转发人数 0, 视频作者 朱墨老师, 作者简介 大学副教授,硕士生导师,相关视频:【科普教程】RT-qPCR(实时荧光定量PCR)的数据计算(下
如果是目的基因和内参基因的扩增效率相差比较大,可以用扩增效率进行校正,也就是Pfaffl方法。所用公式如下: 处理所致倍数变化(fold change)= C(A-E)/D(F-B) 扩增效率(E)=10-1/斜率(理想的PCR扩增效率=2) 百分比表示为:e%=(E-1)×100% 同时是上面例子,如果Cdk5的扩增效率是70%;GAPDH的扩增效率是95%,那...
一. RT-qPCR 基本原理和概念实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 以cDNA 为模板进行 PCR,在 PCR 扩增过程中,通过收集荧光信号,对 PCR进程进行实时...
rt-pcr计算方法rt-pcr RT-PCR, or real-time polymerase chain reaction, is a widely used method for detecting and quantifying the presence of specific genetic material in a sample. It is an essential tool in molecular biology, medical diagnostics, and research, and its accuracy and sensitivity ...
qRT-PCR实验流程:提取组织/细胞总RNA,以其中的mRNA为模板,利用逆转录酶反转录成cDNA,再进行PCR扩增,通过计算2^-ΔΔct值获得基因表达量。 首先,计算每组内参基因sgAction Ct均值 然后,计算第一个 Δct,即每组的待检目的基因减去内参基因的 Ct 值 接着,计算对照CK组中 Δct 的均值,再用处理组的 每一个Δct...
RT-PCR相对定量有两个模型，⼀是ΔΔCt 模型，⼀个是扩增效率校正模型。这⾥我们先讨论简单的模型：ΔΔCt 模型，在这⼀模型中，假定扩增效率为2，即每个PCR cycle，产物倍增，由以下公式给出：Ratio=2−ΔΔCt 其中ΔΔC t = ΔΔC treated - ΔΔC control, ΔΔC treated和ΔΔC control...
先来说说rt-pcr是啥。简单来讲,就是一种能把很少很少的RNA变得多多的,然后还能检测和定量的技术。就好比您有一颗小小的种子,通过特殊的方法,让它长成了一棵大树,这样就能更清楚地看到和研究它啦。 那这计算公式呢,就像是这棵大树成长的规律。比如说,Ct值就是其中一个重要的概念。这个Ct值啊,跟起始模板的量有...
用实时PCR对基因表达进行相对定量分析需要特殊的公式、假设以及对这些假设的验证。2-△△CT方法可用于定量PCR实验来计算基因表达的相对变化:2-△△CT公式的推导,以及实验设计,有效性评估在Applied Biosystems User Bulletin No.2(P/N4303859)中有介绍。用2-△△CT方法分析基因表达数据在文献中也有报道(5,6)。本文...
还有啊,在实际应用中,RT-PCR公式可帮了大忙。比如说在检测病毒的时候,通过这个公式计算出来的结果,就能告诉我们病毒的含量是多少,从而判断病情的严重程度。这就像是给医生配了一双超级厉害的“透视眼”,能一下子看到身体里的秘密。 总之呢,RT-PCR公式虽然看起来有点复杂,但是只要我们认真去研究,去实践,就能发现它...