实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针 和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发岀的淬灭基团,新链 延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发岀荧光。利用 RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( ) A. RT-PCR技术需要...
1 原理：利用PCR高度的特异性，通过特定的引物能在复杂样品中得到的特定序列的DNA，而这种特定DNA的产量跟反应初始阶段模板量是直接相关的。简单说来。经过一个PCR循环，可以把一个模板变成两个，在经过一个循环，就会变成四个，以此类推。如果PCR的检测线是1000个产物，那么当你的初始样品中模板是n个，那就需要经...
PCR技术的基本原理:类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物...
荧光RT-PCK检测病毒核酸阳性是新型冠状病毒(+RNA病毒)感染确诊的标准。实时荧光RT-PCR核酸检测的基本原理:用特定的 TaqMan探针(单链小DNA片段,检测不到荧光)与待测基因序列结合,随着PCR 扩增反应的进行,TaqMan探针被具有外切酶活性的Taq酶切除水解并发出荧光,荧光强度反映扩增后待测基因的总量。原理如下图探针水解TaqMa...
PCR产物检测：一般采用琼脂糖凝胶电泳，必要时也可使用聚丙烯酰胺凝胶电泳。反转录引物选择：Oligo dT：...
1 原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。RT- PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain ...
该方法的原理是将病毒RNA先通过逆转录酶转录成cDNA,随后通过聚合酶链式反应(PCR)将cDNA扩增。同时使用荧光素或染料标记的引物,使得扩增的靶标序列与荧光素或染料相结合,释放出荧光信号。 通过检测荧光信号的强度和数量,可判断样本中是否含有该病毒核酸序列,并且可以对其进行定量分析。这种方法具有快速、高灵敏度和高特异...
【实验原理】 聚合酶链式反应PCR过程利用模板变性,引物退火和引物延伸的多个循环来扩增DNA 序列。因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板,是一个指数增长的过程,使其成为检测核酸和克隆基因的一种非常灵敏的技术。 一般经过25-35轮循环就可使模板DNA扩增达106倍。逆转录RT-PCR把以RNA为模板的cDNA合成(即 RNA...