用于RT-PCR 的 SuperScript™ 第一链合成系统经过优化,以从纯化 poly(A)+ 或总 RNA 合成第一链 cDNA。此系统可与低至 1 ng 或高达 5 µg 的总 RNA 一起使用。合成后,可通过 PCR 用特异性引物扩增 cDNA,而无需中间有机提取或乙醇沉淀。结合 PCR 时,该系统可用于检测稀有信息的存在,量化少量细胞的特...
RT-PCR）是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。实验
实时荧光定量 PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR)是 DNA 的实时 PCR 扩增，通过荧光探针测量，最常...
进行PCR时，TaqMan探针可特异地复性杂交到 PCR 产物上。Taq 酶在链延伸过程中遇到与模板结合的 TaqMan探针，其 5'→3'外切酶活性将探针降解，使荧光报告基团与淬灭基团分开，破坏了 FRET，从而产生荧光信号，信号强度与PCR过程中扩增得到的靶DNA产物量成正比。因为只有靶序列与探针互补时荧光信号才会增加，所以不会检测...
Invitrogen SuperScript IV UniPrime 一步法 RT-PCR 系统是一种便捷的一步法配方,可在单管中进行快速 cDNA 合成和 PCR 扩增。它将高持续性的 SuperScript IV 反转录酶 (RT) 与新型 UniPrime RT-PCR 预混液相结合,与其他一步法 RT-PCR 试剂盒相比,使用更简单,性能出众。
SYBR Green I染料法qRT-PCR具体如下:将DTMUV RNA按照Trans Script One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis Super Mix试剂盒说明书,进行以下20.0 μL反转录体系配置:Random Primer(0.1 μg/μL)1.0 μL,2×TS Reaction Mix 10.0 μL,...
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Primers used for RT-PCR and cDNA synthesis.Arif Muhammad KhanMuhammad AshfaqZsofia KissAzhar Abbas KhanShahid MansoorBryce W. Falk
实时荧光定量PCR 荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR)是通过检测DNA双链结合的染料,是 SYBR® Green I对DNA扩增过程中的起始量进行定量监测的技术手段。qPCR实验结果包含扩增曲线和溶解曲线。 1. 扩增曲线 1)正常的扩增曲线一般呈S型、有明显的四个时期,Ct值在20-30之间,且复...
用传统的PCR法检测microRNA的挑战在于,两个常规PCR引物的总长度几乎是microRNA长度的两倍,因此不适合于做miRNA的引物。今天小艾给大家带来了升级版的基于PCR法的miRNA定量检测试剂盒——双尾RT-qPCR。