RT-PCR,全称逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction),是一种分子生物学技术。这项技术结合了逆转录和PCR两大过程,主要用来检测和量化RNA序列。 首先,RT-PCR通过逆转录酶的作用,将RNA模板反转录成互补DNA(cDNA)。这一步骤是因为RNA不稳定,不易直接进行PCR扩增,因此通过逆转录将RNA转化为...
rt-pcr是什么意思 RTPCR,反转录·聚合酶链反应是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。 1rt-pcr影响因素 RT-PCR反应受多个因素影响,如硫酸镁的浓度, 引物退火的温度,扩增的循环数等。 1、建议选择0.5-3.0 mM (相差0.5...
RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种RNA的含量。检测基因表达的方法,参见Northern Blot法。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录,要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种,即鸟类成髓细胞性白细胞病毒...
RT-PCR技术概述 RT-PCR简介 RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。 首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。 RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。
RT -PCR即逆转录-聚合酶链反应。原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录...
RT-PCR即逆转录PCR,是将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。原理 指对组织或细胞的总RNA进行...
PCR过程。(3)根据图示,该过程是以 cDNA单链为模板的,第一次扩增需要 1个引物,之 后每扩增一次,DNA单链的数目增加一倍,所需的引物也增加一倍,因此扩增 n次后需要 的引物数量为2n一1个。(4)利用RT- PCR技术获取的目的基因能在物种间交流,该技术 增加了 RNA逆转录产生的DNA浓度,便于检测。(5)根据图示可知,...
RT-PCR是将RNA的逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。如图是RT-PCR过程示意图,①和②为逆转录过程,③是PCR过程。据图分析下列叙述错误的是( )A.该技术可用来检测新冠病毒等RNA病毒B.该技术可用来检测组织细胞中基因的转录C.①②过程需要的酶是逆转录酶,③过程中需要的酶是Taq酶D.③过程中DNA...