逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)是一种分子生物学技术,用于检测和扩增RNA。它结合了逆转录和聚合酶链式反应(PCR)两种技术,可以将微量的RNA样品扩增至可检测水平。RT-PCR在医学、诊断、基础研究等领域有着广泛的应用。 原理 RT-PCR的基本原理是:首先,利用逆转录酶将RNA模板转录成cDNA(互补DNA);然后,通过PCR技术对cD...
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。作用 RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极...
PCR技术的基本原理:类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物...
【实验原理】 聚合酶链式反应PCR过程利用模板变性,引物退火和引物延伸的多个循环来扩增DNA 序列。因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板,是一个指数增长的过程,使其成为检测核酸和克隆基因的一种非常灵敏的技术。 一般经过25-35轮循环就可使模板DNA扩增达106倍。逆转录RT-PCR把以RNA为模板的cDNA合成(即 RNA...
1. RTpcr RTpcr技术的基本原理是先利用逆转录酶将目标RNA转录成cDNA(亦称为反转录,即逆转录),然后以cDNA作为模板进行PCR扩增。整个过程分为两个关键步骤:逆转录和PCR反应。 2. 逆转录过程是RTpcr技术的第一步,其目的是将RNA转录成cDNA。逆转录酶是这一步的关键酶类,它能够将RNA作为模板,并合成相应的cDNA。
RTPCR技术主要包括逆转录、PCR放大和检测三个步骤。 1. 逆转录是将RNA转录为DNA的过程。在逆转录过程中,需要使用逆转录酶、RNA模板和引物(primers)进行反应。逆转录酶能够将RNA模板中的核苷酸序列反转录成互补的DNA链。引物是一小段DNA或RNA序列,在逆转录过程中与RNA模板发生互补配对,作为起始合成新DNA链的起点。
1. 普通RT-PCR 普通RT-PCR是最基本和最常用的RT-PCR技术。它通过引物的定向扩增，使特定的RNA序列...
chain reaction, RT-PCR）是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。
一、原理 RT-PCR即反转录聚合酶链反应，是一种分子生物学技术。其基本原理是：1. 反转录：以RNA为模板，通过反转录酶合成DNA。2. 聚合酶链反应：利用DNA聚合酶对特定DNA序列进行扩增。具体过程为：先从细胞或组织提取RNA，然后通过反转录酶将RNA逆转成DNA，再以这段DNA为模板，利用特定的引物进行PCR...