RT—PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用，从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，在DNA聚合酶作用下扩增合成目的片段。RT—PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆...
RTpcr技术的基本原理是先利用逆转录酶将目标RNA转录成cDNA(亦称为反转录,即逆转录),然后以cDNA作为模板进行PCR扩增。整个过程分为两个关键步骤:逆转录和PCR反应。 2. 逆转录过程是RTpcr技术的第一步,其目的是将RNA转录成cDNA。逆转录酶是这一步的关键酶类,它能够将RNA作为模板,并合成相应的cDNA。常用的逆转录...
实时荧光RT-PCR可用于新型冠状病毒的核酸检测,RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增反应相结合的技术,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测...
通过该技术,可以对RNA进行逆转录合成DNA,然后利用聚合酶链反应(PCR)放大DNA的特定片段。RTPCR技术在医学、生物学和疾病诊断领域具有广泛的应用。 二、 RTPCR技术主要包括逆转录、PCR放大和检测三个步骤。 1. 逆转录是将RNA转录为DNA的过程。在逆转录过程中,需要使用逆转录酶、RNA模板和引物(primers)进行反应。逆...
原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。RT- PC
PCR技术的基本原理:类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物...
chain reaction, RT-PCR）是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。
RT-PCR是一种利用逆转录酶（Reverse Transcriptase）将RNA转换为cDNA，再通过PCR扩增cDNA的技术。其原理...