25mmol/L)Volume(µl5.02.52.5 Primer1 Primer2TaqDNApolymeraseddH2OTotal cDNAPCR扩增 1 111225 DEPC-H2O Total 3.6 20 cDNA第一链合成反应 实验目的 了解RT-PCR的基本原理。熟悉RT-PCR的常规步骤。掌握琼脂糖凝胶电泳技术。实验要求 掌握PCR技术。学会操作PCR仪。熟悉琼脂糖凝胶电泳技术。
图1 PCR产物检测的琼脂糖凝胶电泳 观察结果: ① 是否有扩增产物。 ②如有拖尾或有几条区带,说明有非特异性扩增。 ③分子量标准电泳后区带是否分开。 ④与分子量标准比较,PCR产物的长度是否正确。 ⑤PCR产物的产量。 ⑥引物二聚体。 RT-PCR检测人β-actin基因表达 扩增产物长度 260 bp 问题及解决方法 无...
琼脂糖凝胶电泳可以用于分析DNA、RNA和蛋白质的分子量和纯度。琼脂糖凝胶电泳在分子生物学研究中的应用06结论成功提取了高质量的人类细胞质RNA,为后续的RT-PCR实验奠定了基础。实验方法简便、快速,适用于大量样本的处理。琼脂糖凝胶电泳结果显示,提取的RNA片段大小分布均匀,无明显降解。成功将提取的RNA应用于RT-PCR实验...
人类细胞质、RT-PCR的原理、方法、琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 分离提纯RNA的目的 分析不同发育时期基因的表达状况获得新基因研究基因的拼接分析相应的蛋白产物 RNA提取的原理 在哺乳动物中，rRNA占总量的80%-85%，tRNA和核内小分子RNA占10-15%，而mRNA只占1-5%。rRNA由28S、18S、5S等几类组成，这些...
细胞质R;细胞质RNA提取的方法利用离心;通过电泳或芯片技术检测提取的R;03RT-PCR技术;将RNA反转录成cDNA的过程;使用特定的试剂和离心技术从细胞;结果分析对扩增产物进行精确的定;04琼脂糖凝胶电泳结果分析;琼脂糖凝胶电泳的原理琼脂糖凝胶;通过溴化乙锭等荧光染料对DNA;对照实验设置阳性对照和阴性对照;05应用分析;细胞...
主要内容 ◆人类细胞质RNA提取◆RT-PCR的原理、方法◆琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 2018/11/27 人类细胞质RNA提取 提取总RNA 电泳 合成cDNA第一链 2018/11/27 PCR 真核细胞RNA的种类 真核细胞总RNA主要由rRNA（80-85%）、tRNA和核内小分子RNA(10-15%)、mRNA（15%）组成，其中rRNA、tRNA和mRNA位于细胞质...
1. RT-PCR结果分析 我们首先进行了RNA提取和逆转录反应,得到了各组织或条件下的cDNA样本。然后,我们设计了特异性引物,进行了PCR扩增。最后,通过琼脂糖凝胶电泳,观察到了PCR产物的带型。 根据PCR产物的带型,我们可以初步判断目标基因在不同组织或条件下的表达水平。比如,在组织A中,我们观察到了明显的PCR产物带,说...
1)RT-PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction):中文名称叫逆转录PCR或反转录PCR,是指将RNA反转录成cDNA, 然后使用PCR技术对cDNA进行扩增检测的技术。普通RT-PCR适用于样本数量较少的情况,但需要后续的凝胶电泳和DNA序列分析。 2)RT-qPCR((R...