1、本发明的目的是提供一种用于可视化检测干尖线虫的rpa-crispr/cas12a引物组和探针及应用,以解决上述现有技术存在的问题,利用rpa-crispr/cas12a引物组和探针可以便捷、高效的检测干尖线虫,且具有特异性和高灵敏度等优势。 2、为实现上述目的,本发明提供了如下方案: 3、本发明提供了一种用于可视化检测干尖线虫的rpa...
本发明提供一种检测多列拟菱形藻的RPA‑CRISPR/Cas12a‑LFD方法及试剂盒,其中上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1、下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:2、探针的序列为TTATT;且作为CRISPR RNA使用的crRNA‑2的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。本发明提供的RPA‑CRISPR‑LFD检测方法,在39℃的条件下,40min即可完...
快速、灵敏的核酸检测方法是核酸检测的关键,基于RNA引导的CRISPR/Cas12a核酸酶的方法在核酸检测方面展现出很大的前景,然而在目前的方法中,DNA扩增和随后的Cas12a切割是分开的,并且整个反应过程长达两个小时,最重要的是,中途的开盖操作可能会增加气溶胶污染的风险。 近期复旦大学王永明团队[1]研究发现一种名为“Cas12a...
parasuis that is fast to detect, easy to implement, and accurate to analyze, known as RPA-CRISPR/Cas12a analysis. The process from sample to results can be completed within 1 h with high sensitivity (0.163 pg/渭L of DNA template, p < 0.05), which is 104 -fold higher than the common...
(54)发明名称一种基于RPA-CRISPR-Cas12a系统快速检测幽门螺杆菌的试剂盒及方法(57)摘要本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR‑Cas12a系统快速检测幽门螺杆菌的试剂盒及方法,所述试剂盒包含UreB基因的RPA引物及crRNA;检测时通过先对病例的待测样品进行RPA扩增,再在CrRNA序列介导下,引导CRISPR‑Cas12a检测体系对RPA扩增...
MAPnavi系统的检测流程分为:采集拭子样本-核酸的磁珠纯化-加样到离心圆盘-RPA扩增-CRISPR扩增-数据分析。MAPnavi系统的检测周期短至40分钟(嵌套RPA:25-30分钟,CRISPR / Cas12a:5-10分钟),灵敏度为1拷贝μL−1的核酸模板。通过利用基于磁珠组合的简单快速(手动操作为 5 分钟)提取方案,多重检测的检测限值降至...
本研究开发了一种结合RPA、CRISPR/Cas12a和磁珠-酶新型报告系统,用于ASFV基因的快速精准诊断的方法。如图1所示,biotin-ssDNA-azide与DBCO修饰的碱性磷酸酶(ALP)通过点击化学反应合成biotin-ssDNA-ALP,biotin-ssDNA-ALP与链霉亲和素修饰的磁珠(SA-MB)结合获得MB-ssDNA-ALP报告系统。用RPA扩增ASFV基因序列,获得扩增子,...
RPA辅助的CRISPR/Cas12系统联手荧光LFA 在这项研究中,使用RPA辅助的CRISPR/Cas12a同时具有荧光和LFA信号输出模式,建立了来自蜡样芽孢杆菌的两个三组分肠毒素基因nheABC和hblACD的检测平台(图1)。在整个实验过程中,首先通过RPA分别扩增每个肠毒素基因以获得足够的扩增子,然后激活携带相应crRNA的CRISPR/Cas12a的反式切割...
伯豪生物全称上海伯豪生物技术有限公司,在生命科学领域为科研工作者提供技术支持及服务、科研试剂产品的公司。主营业务:单细胞测序、单细胞核测序、单细胞ATAC测序、单细胞TCR测序、单细胞BCR测序、空间基因测序、空间转录组测序、FFPE空间转录组测序等,多组学科研技术服
gRNA和探针检测副猪嗜血杆菌的方法,其特征 在于,包括如下步骤: 步骤1:提取待检测样本的DNA; 步骤2:使用RPA引物组和核酸扩增试剂对步骤1中获得的DNA进行核酸扩增反应,得到 核酸扩增产物; 步骤3:将gRNA、探针和Cas12a酶与步骤2中得到的核酸扩增产物混合,对所述核酸扩增 产物进行CRISPR/Cas12a反应; 步骤4:通过荧光...