RP-HPLC纯化的关键步骤是梯度洗脱。在梯度洗脱过程中,通过改变溶剂体系的组成,将样品中的目标肽从色谱柱上洗脱下来。一般情况下,初始时使用较为亲水的溶剂组成,逐渐增加疏水溶剂的比例,以实现肽的分离纯化。梯度洗脱的条件需要根据具体样品的特点进行优化。 第五步:收集和分析 在RP-HPLC纯化过程中,洗脱液会通过检测器...
反相高效液相色谱(RP-HPLC)中通常使用哪种流动相进行肽分离和纯化?最常见的流动相是水和乙腈,三氟乙酸(TFA)充当离子对试剂。根据不同的肽段,采用合适的梯度洗脱进行肽段分离。 相关服务: 肽纯度分析 提交需求 姓名* 联系类型 * 联系方式 * 项目描述 咨询项目 * 提交需求 How to order?
纯化肽的制备性RP-HPLC方法描述了在RP-HPLC系统上将目标多肽与至少一种不想要的成分分离的方法,其中至少一个洗脱步骤在或接近目标肽的pI值下进行.X.吴A.博格斯内斯
甲醇-水为流动相分离纯化LDV短肽及其衍生物的RP-HPLC方法
目的:建立分离纯化鉴定牛蒡(Arctium lappa L.)叶中绿原酸(chlorogenic acid)的Polyamide SC 6柱层析/RP-HPLC/LC-ESI-MS方法.方法:牛蒡叶经80%甲醇抽提,减压浓缩后,用氯仿去色素,得粗提物.粗提物经Polyamide SC 6柱层析,依次用水、30%甲醇、60%甲醇及甲醇洗脱,甲醇洗脱组分进行RP-HPLC和LC-ESI-MS...
本文建立了分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甙的硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS方法.拳卷地钱叶经过80%乙醇提取后,减压蒸馏,得粗提物.拳卷地钱叶粗提物用甲醇溶解后上硅胶柱,用不同浓度的甲醇-氯仿溶液洗脱,各洗脱液进行RP-HPLC分析,较纯的洗脱液进行LC-ESI-MS分析,为制...
图2. 以RP-HPLC对紧密关联的肽类进行分离。仅有一个氨基酸不同的两种十肽菌素,一种含丝氨酸,而另一种含苏氨酸。 试样肽图与参照蛋白质肽图的比较 肽图能够提供有关蛋白质的很多信息。一般做法是对试样的肽图和参照蛋白质的肽图进行比较。 图3对重组人生长激素(在大肠杆菌中表达)的肽图和天然人生长激素(缺乏...
多肽和蛋白质的反相色谱(RP-HPLC)分析法需要“离子对试剂”。 在流动相中加入离子对试剂,以实现良好的峰形。 目前认为,在没有离子对试剂的情况下,硅胶表面的金属杂质是导致蛋白质/多肽峰形较差的原因。 三氟…
多肽/蛋白质HPLC分析中的流动相选择 有机溶剂可将吸附在疏水界面的蛋白质洗脱(如图1)。 在梯度洗脱期间,当有机溶剂量达到针对每一蛋白质的特定浓度时,蛋白质就会从疏水界面上解吸,继续顺着柱向下,从而从柱中洗脱。 图1. 当有机改性剂的浓度达到特定值时,蛋白质从疏水界面洗脱。 乙腈 在多肽的反相色谱分离时最...
RP-HPLC 是一种有效的多肽/蛋白纯化工具。通过RP-HPLC 法可以把粗品中的杂质分离得到目标多肽/蛋白。收集到的多肽、蛋白片段可以用于进一步研究,也可以作为治liao药物。 在蛋白/多肽分析过程中,色谱条件优化的目标是优化分辨率和保留时间。 制备色谱法分离蛋白/多肽时,色谱条件的开发主要是三个参数的优化(参见图1)。