一、RP-HPLC原理 RP-HPLC利用不溶于水的固定相和溶于水的流动相之间的相互作用来实现物质的分离。常用的固定相是在硅胶或者其他基质上修饰了亲水基团(如羧基、氨基等)的聚合物,而流动相主要是有机溶剂和水的混合物。在RP-HPLC中,流动相中的有机溶剂比水含量高,因此被称为有机溶剂为主的流动相。 RP-HPLC的...
在RP-HPLC中,对于可电离的化合物,流动相的pH会影响其电离状态从而改变其疏水性,进而影响其保留。在碱性化合物的反相分析中,当考虑用离子对方法时,需要确保化合物处于完全的质子化,也就是充分带上正电荷,这样才能和离液剂阴离子充分作用。在满足这个要求下,离液效应和pH关系不大。由于很多离液阴离子(如高氯酸根离...
百度试题 题目中药制剂分析中采用RP-HPLC测定含量,其分离样品原理是 相关知识点: 试题来源: 解析 分配+吸附 反馈 收藏
原理: RP-HPLC使用非极性的固定相(通常为C18或C8烷基链)填充在色谱柱中。样品在溶剂流动的影响下,与固定相发生相互作用,分离出来。在RP-HPLC中,极性的化合物会更快地溶解在溶剂中并通过流动,而非极性的分析物则会更容易与固定相发生相互作用,滞留时间较长。 应用: RP-HPLC广泛应用于化学、生物、制药、食品等领...
在RP-HPLC中,对于可电离的化合物,流动相的pH会影响其电离状态从而改变其疏水性,进而影响其保留。在碱性化合物的反相分析中,当考虑用离子对方法时,需要确保化合物处于完全的质子化,也就是充分带上正电荷,这样才能和离液剂阴离子充分作用。在满足这个要求下,离液效应和pH关系不大。由于很多离液阴离子(如高氯酸根离...
RP-HPLC中的离液剂:原理与应用 根据统计,超过半数的药物分子含有碱性官能团。在常用的中性和酸性条件下,这些碱性基团一般以带正电荷的状态存在,亲水性增强,疏水保留减弱,同时由于存在与常用的硅胶基质的色谱柱上残留硅羟基的强的次级作用(如离子交换等),因此可能带来峰型的问题。
RP-HPLC中的离液剂:原理与应用 根据统计,超过半数的药物分子含有碱性官能团。在常用的中性和酸性条件下,这些碱性基团一般以带正电荷的状态存在,亲水性增强,疏水保留减弱,同时由于存在与常用的硅胶基质的色谱柱上残留硅羟基的强的次级作用(如离子交换等),因此可能带来峰型的问题。
RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。 反相色谱法适于分离非极性、极性或离子型化合物，大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。定义 反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相...