在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的吸附...
此外,离液剂可以让极弱疏水性碱性质子化合物在常规C18上产生保留,如案例2所示(Histamine: LogD(pH5.5) = -4.20,2-Phenylethylamine: LogD(pH5.5) = -1.52, Tyramine: LogD(pH5.5)=-2.5, Octopamine: LogD(pH5.5) = -3.45, Tryptamine: ACD/LogD(pH5.5) = -1.42,Serotonin: LogD(pH5.5) = -2.49)。
在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的吸附...
在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的吸附...
在RP-HPLC中,对于可电离的化合物,流动相的pH会影响其电离状态从而改变其疏水性,进而影响其保留。在碱性化合物的反相分析中,当考虑用离子对方法时,需要确保化合物处于完全的质子化,也就是充分带上正电荷,这样才能和离液剂阴离子充分作用。在满足这个要求下,离液效应和pH关系不大。由于很多离液阴离子(如高氯酸根离...
图2为RP-HPLC中离液试剂的可能作用机理。使用离液剂进行碱性质子化合物分析时,首先在流动相中添加一定浓度的离液盐试剂,常用的有三氟乙酸跟离子、四氟硼酸根离子、高氯酸根离子以及六氟磷酸根离子。随着色谱柱的平衡,疏水C18表面会富集形成亲脂的有机相层(如甲醇、乙腈、四氢呋喃)。随后亲脂的离液阴离子会在有几...
抛开石墨碳色谱柱(pH耐受范围0~14)、HILIC色谱柱、离子交换色谱柱不谈,若要在常规C18上实现有效保留,对于强酸性化合物,可通过离子对色谱法实现保留;对于强碱性化合物,可通过离子对色谱法或离液剂实现保留。本文的目的旨在通过对两者的保留机理进行浅析、并结...