一、RP-HPLC的原理 RP-HPLC通过使用疏水固定相和溶剂系统控制溶解度差异实现物质的分离。在RP-HPLC中,疏水固定相通常是含有C18链或者其他疏水性功能团的硅胶或化学键合硅胶,而样品则是通过疏水作用与固定相发生相互作用。当样品溶解度与固定相相比较大时,样品将与固定相更多地发生作用,分离效果更好。因此,RP-HPLC常...
一、RP-HPLC原理 RP-HPLC利用不溶于水的固定相和溶于水的流动相之间的相互作用来实现物质的分离。常用的固定相是在硅胶或者其他基质上修饰了亲水基团(如羧基、氨基等)的聚合物,而流动相主要是有机溶剂和水的混合物。在RP-HPLC中,流动相中的有机溶剂比水含量高,因此被称为有机溶剂为主的流动相。 RP-HPLC的...
反相高效液相色谱法（RP-HPLC）使用亲水性的固定相和疏水性的移动相，利用样品分子在移动相和固定相之间的互作用力差异进行分离。一、基本原理：1.疏水性固定相：反相色谱柱通常使用疏水性的固定相材料，如疏水链状碳氢化合物改性的硅胶或封闭的C18链，使分析物在移动相中具有亲水性，与固定相表面发生疏水作...
在RP-HPLC中,对于可电离的化合物,流动相的pH会影响其电离状态从而改变其疏水性,进而影响其保留。在碱性化合物的反相分析中,当考虑用离子对方法时,需要确保化合物处于完全的质子化,也就是充分带上正电荷,这样才能和离液剂阴离子充分作用。在满足这个要求下,离液效应和pH关系不大。由于很多离液阴离子(如高氯酸根离...
简而言之,UPLC是用HPLC的极限作为自己的起点。 随后,Waters公司推出了世界上第一台超高效液相色谱仪ACQUITY UPLC,将液相色谱理论和制造技术重新推向了另一个高峰。超高效液相色谱是分离科学中的一个全新类别, UPLC借助于HPLC的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、极低的系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量...
RP-HPLC的原理是利用固定相为亲水性的填充柱,称为反相色谱柱。样品中的非极性或弱极性化合物会与反相柱上的亲水性固定相发生吸附,从而实现样品中化合物的分离。一般使用的反相填充固定相有C18、C8和C4等。 RP-HPLC的仪器配置主要包括溶液调制系统、进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统等。溶液调制系统负责溶解和...
2. 原理 HPLC RP法基于样品溶液中化合物的亲水性和疏水性之间的相互作用进行分离。在RP柱中,固定相通常是一种疏水性的材料,如C18矽胶。样品中的化合物会与固定相发生相互作用,疏水性的化合物与固定相相互作用较强,因此在柱中停留时间较长;而亲水性的化合物与固定相相互作用较弱,因此在柱中停留时间较短。通过调...
2.方法原理:RP-HPLC是一种常用的分析方法,通过分离样品中的维生素B12,并使用荧光检测器检测其浓度,从而确定维生素B12的含量。 3.试剂和材料:该方法需要使用经过验证的试剂和标准品,如乙腈、磷酸盐缓冲液等。 4.仪器和设备:该方法需要使用高效液相色谱仪和相应的检测器,如荧光检测器。 5.样品处理:对于婴儿配方奶粉...
RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。 反相色谱法适于分离非极性、极性或离子型化合物，大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。反相高效液相色谱是化学键合相色谱法的一种。化学键合相色谱法是由液液色谱法发展起来的，是为了解决在分离过程中，机械吸附...