RP-HPLC通过使用疏水固定相和溶剂系统控制溶解度差异实现物质的分离。在RP-HPLC中,疏水固定相通常是含有C18链或者其他疏水性功能团的硅胶或化学键合硅胶,而样品则是通过疏水作用与固定相发生相互作用。当样品溶解度与固定相相比较大时,样品将与固定相更多地发生作用,分离效果更好。因此,RP-HPLC常用于疏水性化合物的分...
RP-HPLC使用非极性的固定相(通常为C18或C8烷基链)填充在色谱柱中。样品在溶剂流动的影响下,与固定相发生相互作用,分离出来。在RP-HPLC中,极性的化合物会更快地溶解在溶剂中并通过流动,而非极性的分析物则会更容易与固定相发生相互作用,滞留时间较长。 应用: RP-HPLC广泛应用于化学、生物、制药、食品等领域的分...
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RP-HPLC中的离液剂:原理与应用 根据统计,超过半数的药物分子含有碱性官能团。在常用的中性和酸性条件下,这些碱性基团一般以带正电荷的状态存在,亲水性增强,疏水保留减弱,同时由于存在与常用的硅胶基质的色谱柱上残留硅羟基的强的次级作用(如离子交换等),因此可能带来峰型的问题。
反相高效液相色谱(RP-HPLC):结果与保留值之间的关系:利用RP-HPLC分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数,Wilce等利用多线性回归方法对2106种肽的保留性质与结构进行分析,得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系,其中极性氨基酸残基在2～20氨基酸组成的肽中,可减少在柱上的保留...
RP-HPLC的原理是基于溶剂在填料上的吸附和解吸作用。填料的极性决定了化合物在其上的吸附性能,而移动相的极性决定了化合物在填料上的解吸性能。在RP-HPLC中,填料的反相特性使得非极性和弱极性化合物更容易被吸附,并随后被分离。 RP-HPLC的步骤包括样品的预处理、色谱柱的平衡和实际的分离过程。首先,样品必须被准备...
RP-HPLC的原理是利用固定相为亲水性的填充柱,称为反相色谱柱。样品中的非极性或弱极性化合物会与反相柱上的亲水性固定相发生吸附,从而实现样品中化合物的分离。一般使用的反相填充固定相有C18、C8和C4等。 RP-HPLC的仪器配置主要包括溶液调制系统、进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统等。溶液调制系统负责溶解和...
离液盐在RP-HPLC中非常重要的应用是增强碱性化合物的保留。据估计,现在大约有80%的药物分子中含有碱性官能团,但是由于其在RP-HPLC上的保留随流动相pH的变化太极端,且容易与硅胶基质色谱柱中残留硅醇作用而拖尾,因此这些化合物的RP-HPLC分析一直存在挑战性,而阴离子型...
RP-HPLC 是一种有效的多肽/蛋白纯化工具。通过RP-HPLC 法可以把粗品中的杂质分离得到目标多肽/蛋白。收集到的多肽、蛋白片段可以用于进一步研究,也可以作为治liao药物。 在蛋白/多肽分析过程中,色谱条件优化的目标是优化分辨率和保留时间。 制备色谱法分离蛋白/多肽时,色谱条件的开发主要是三个参数的优化(参见图1)...