2.实验流程 DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,再...
还有一种pull down 方法：CHIRP，也可以了解一下，希望可以找到合适的方法，加油！RNA-DNA-蛋白互作：CH...
这是研究的难点。想知道LINC01138是通过结合了什么蛋白,发挥了癌基因的作用,就需要用到今天的重点讲解的技术——RNA pull down技术! 这个技术听上去很魔幻,其实就是富集某个具体的长非编码RNA,然后分析它所结合的蛋白质。 主要实验分为2步:(以下是简...
——RNA pull down。进⼊正题之前，先通过⼀篇Nature Communications的⽂章“The LINC01138 drives malignancies via activating arginine methyltransferase 5 in hepatocellularcarcinoma”回顾⼀ 下LncRNA在疾病体系中的研究套路：1选中⼀个LncRNA 通过⾼通量的⽅法（包括⾃⼰测序以及挖别⼈的数据）筛选到...
广州赛诚生物科技有限公司自主研发生产的RNA pulldown检测试剂盒是一组完整的优化的试剂,可以用来对哺乳动物细胞或组织进行RNA pulldown实验。优化的方案和组分使得非特异性背景降低并提高目的蛋白的得率。 通过此试剂盒所得蛋白产物可以用于各种下游实验,如western-blot,银染和 MS质谱鉴定。
那么LINC00571是怎么样去调控IDH2的呢?他们用LINC00571去进行了RNA Pulldown,结果拉下来了的是HNRNPK和ILF2。接着他们分析了HNRNPK的结构域与LINC00571的结合位置,并验证了LINC00571与HNRNPK和ILF2的相互作用,在示意图上也显示了: 那么既然LINC00571、HNRNPK和ILF2可以形成一个复合物,那么这种复合物会有什么样的...