5实验结果 l正义链和反义链PCR扩增琼脂糖凝胶图 Marker:StarMarker D8000 Sense:正义链产物 Antisense:反义链产物 二.RNA pull down实验 1实验目的:通过RNA pull down实验,在HNEpc细胞的对照组及模型组中钓取与lnc NEAT1有相互作用的蛋白;并进行WB验证。 2实验材料 l主要试剂 l主要仪器及器材 3实验方法 l体外...
Pull down技术的基本原理是将一种蛋白质固定于某种基质上(如Sepharose),但细胞抽提液经过该基质时,可与该固定蛋白相互作用的配体蛋白被吸附,而没有被吸附的“杂质”则随洗脱液流出。被吸附的蛋白可以通过改变洗脱液或洗脱条件而回收下来。通过pull down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用...
5实验结果 l 正义链和反义链PCR扩增琼脂糖凝胶图 Marker: StarMarker D8000 Sense:正义链产物 Antisense:反义链产物 二.RNA pull down实验 1实验目的:通过RNA pull down实验,在HNEpc细胞的对照组及模型组中钓取与lnc NEAT1有相互作用的蛋白;并进行WB验证。 2实验材料 l 主要试剂 l 主要仪器及器材 3实验方法 ...
RNA pull down-实验简介 RNA pull down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使⽤体外转录法标记⽣物素RNA探针，然后与胞浆蛋⽩提取液孵育，形成RNA-蛋⽩质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从⽽与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WB 实验检测特定的RNA 结...
Pull down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外转录或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然...
按照说明书的建议用量做,根据结果情况再看是否需要调整探针量。 5.6很多文章中显示用RNA pulldown试剂盒做RNA结合RNA的实验,我们的试剂盒能否这样做?是否修改一些步骤就可以,比如细胞裂解时加入RNA酶抑制剂,后续洗脱RNA,用Trizol提RNA? 做RNA与RNA结合验证,建议用RAP试剂盒。
RNA Pull-down技术实验流程主要包括以下几个步骤：（1）构建含目的基因序列质粒：选择自己感兴趣的基因，根据其序列用同源重组方式或全基因合成构建含目的基因序列质粒；并测序验证序列准确性，并提取含目的基因序列质粒备用；（2）转录模板的获取：T7 RNA聚合酶特异性识别来自T7噬菌体的启动子序列。为了使T7 RNA聚合...
RNA-Pull down实验详细操作方法步骤：一、细胞收集(对于单层细胞或贴壁细胞)准备细胞5E7细胞。用10 mL冰冷的PBS洗涤培养瓶或平板上的细胞两次。加入10 mL冰冷的PBS。从每个培养瓶或平板上刮下细胞，然后转移到离心管。通过在4°C下以1500 rpm离心5 min来收集细胞，并丢弃上清液。细胞沉淀-80℃保存。二、细胞裂解 ...
rna pulldown结果分析 1、 实验简介 RNA pull down是用于检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间互作的实验手段。RNA pull down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测...
GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术，可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶...