Pull down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外转录或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然...
该方法主要是用EU标记新生RNA,再用点击反应-生物素-链霉亲和素系统做RNA-pull down,然后质谱鉴定分离的新生RNA互作蛋白。用该rna pulldown方法,首次鉴定到重要周期蛋白CCK1为RNA结合蛋白。RIP-qPCR、CLIP-Seq等实验进一步证实了CCK1为RBP蛋白,并发挥着重要的细胞。 使用相关技术:RNA pull down WB、RNA pull-down ...
RNA Pull Down 是一种用于研究RNA与蛋白质之间相互作用的实验技术;质谱分析 (Mass Spectrometry, MS) 是一种可用于鉴定和分析复杂生物样品中的蛋白质质量和序列信息的高效、准确的生物分析技术。RNA Pull Down 质谱分析是结合了 RNA Pull Down 和质谱分析的技术,主要用于鉴定特定 RNA 分子与之相互作用的蛋白质。 1...
RNA Pull Down 是一种用于研究RNA与蛋白质之间相互作用的实验技术;质谱分析 (Mass Spectrometry, MS) 是一种可用于鉴定和分析复杂生物样品中的蛋白质质量和序列信息的高效、准确的生物分析技术。RNA Pull Down 质谱分析是结合了 RNA Pull Down 和质谱分析的技术,主要用于鉴定特定 RNA 分子与之相互作用的蛋白质。 1...
RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针，然后与胞浆蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WB实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用，或者结合MS筛选RNA结合的未知蛋白。（图片来源于https://mp.weixin.qq....
RNA-Pull down实验详细操作方法步骤: 一、细胞收集(对于单层细胞或贴壁细胞) 准备细胞5E7细胞。用10 mL冰冷的PBS洗涤培养瓶或平板上的细胞两次。加入10 mL冰冷的PBS。从每个培养瓶或平板上刮下细胞,然后转移到离心管。通过在4°C下以1500 rpm离心5 min来收集细胞,并丢弃上清液。细胞沉淀-80℃保存。
日前,南方医科大学南方医院在知名杂志《Cell Death Dis》发表高分文章,辉骏生物为合作客户提供RNA pull down MS,RNA免疫沉淀(RIP),染色质免疫沉淀(CHIP),LC-MS/MS质谱检测等实验技术支持.辉骏自有质谱实验平台,专业团队为客户及时沟通了解RNA pull down实验内容,价格低
RNA Pull Down 是一种用于研究RNA与蛋白质之间相互作用的实验技术;质谱分析 (Mass Spectrometry, MS) 是一种可用于鉴定和分析复杂生物样品中的蛋白质质量和序列信息的高效、准确的生物分析技术。RNA Pull Down 质谱分析是结合了 RNA Pull Down 和质谱分析的技术,主要用于鉴定特定 RNA 分子与之相互作用的蛋白质。
通过RNA pull-down实验,研究人员可以筛选出与特定RNA分子结合的蛋白质,构建RNA结合蛋白库,进而为RNA与蛋白质相互作用网络的构建提供重要数据。这有助于理解RNA在细胞内的功能和调控机制。 RNA介导的基因调控网络分析在基因调控过程中,RNA通过与特定蛋白质结合,参与调控转录、转译及RNA加工等过程。RNA pull-down可用来...
图1 RNA pull-down技术原理图 技术步骤 探针制备: PCR扩增目的片段,并进行琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况。 纯化、回收片段(使用胶回收试剂盒)。 蛋白+探针+磁珠孵育:将标记有生物素的RNA探针与细胞裂解液混合,并加入链霉亲和素标记的磁珠。 洗脱:多次洗涤以去除非特异性结合的蛋白质和其他污染物。 跑胶银染质谱/WB...