所有的RIG-I/MAVS报告基因细胞系均表达一个含有分泌型荧光素酶基因ISG(干扰素刺激基因)诱导型构件。活化RIG-I/MAVS信号通路可诱导ISG启动子的活化并产生荧光素酶,该酶存在于细胞上清并能够通过荧光素酶检测试剂QUANTI-Luc™检测定量。源于A549的细胞携带一个额外的NF-κB诱导表达分泌型碱性磷酸酶(SEAP)基因构件,该...
该研究了发现了一种不同于PD-1的新的胞内免疫检查点RIG-I,揭示肿瘤中TCR信号诱导RIG-I表达通过PI3K/AKT/糖酵解通路诱导CD8+T细胞失能的机制,为PD-1抗体不敏感肿瘤的免疫治疗提供了新的干预思路。 该研究利用已发表的肝细胞癌/...
接下来作者鉴定了HSV-1感染时被RIG-I识别的RNA类别。首先构建了不会拮抗I型干扰素产生的HSV-1突变病毒。然后HSV-1mut感染flag-RIG-I过表达的HEK293T细胞,通过免疫沉淀的方法纯化RIG-I-bound RNA。通过RNA seq分析RIG-I-bound RNA,对比未感染和HSV-1感染细胞的总RNA,...
RIG-I，又称为DDX58A，包含925个氨基酸残基，属于DExD/H家族，主要分布于胞质中。结构上，RIG-I主要包括N端的两个重复的caspase活化和募集结构域（CARD），中间的解螺旋酶结构和C端的RNA结构域。N端的CARD结构域即使在未感染病毒的条件下，过表达结构域也能促进细胞分泌I型干扰素（IFN）。因此，该结...
RIG-I 即维甲酸诱导基因蛋白 I(RIG-I),是一种病毒双链 RNA 识别受体,主要分布在细胞质中,通过 RLR 诱导产生干扰素和促炎症细胞因子,是天然免疫系统中传递信息的重要环节。 家鸽 RIG-I CDS 全长 5896 bp,编码 928 个氨基酸序列,RIG-I 在任何人情况下其 N 端 CARD 过表达结构域都可以促进细胞分泌 IFN,...
RIG-I的C端包含大约170个氨基酸残基的RNA结合结构域,由于过表达该结构域会抑制病毒引起的干扰素基因的活化,因此,该结构域通常被认为是一个发挥抑制功能的结构域,在没有活化信号存在的时候,该结构域与CARD结构域相互作用,抑制RIG-I的活化。 应用[4][5]
1.肝癌祖细胞中RIG-I的表达下降驱动了肝癌发生研究人员采用化学致癌物DEN诱导了肝癌发生模型，并检测了RIG-I的表达。研究者发现，在肝癌发生过程中，从肝癌祖细胞（HcPC）到肝细胞癌，RIG-I的表达较正常肝细胞下降。由于细胞因子IL-6及其下游的IL-6-STAT3信号通路在肝癌发生过程中起关键作用，故研究者分析了IL-6...
RIG-I配体通过RIG-I非依赖性的、IFN-I激活的机制来诱导肿瘤细胞死亡 RIG-I ligands execute tumor cell death by an RIG-I-independent, IFN-I-primed mechanism. 为了探讨RIG-I对RIG-I配体诱导的肿瘤细胞死亡的影响,作者首先利用CRISPR-Cas9剪除人黑色素瘤细胞1205Lu中表达RIG-I、MDA5以及MAVS蛋白的基因(即DDX...
单纯过表达 该结构域也能促进细胞分泌Ⅰ型干扰素(interferon, IFN).RIG-I 的中间部分主要包含解螺旋酶结构域 Ⅰ-Ⅵ,该结构域为 DExD/H 家族保守结构域,其中解 螺旋酶结构域 I 主要是 WALKERATP 结合结构域,其 突变会导致 RIG-I 功能的失活.C 端的 RNA 结合结 构域包含大约 170 个氨基酸残基,主要司职...