它可能通过与某些特定的分子相互作用,来触发后续包含RFP - LC3的一系列反应。RFP标记的LC3可以方便研究人员直观地观察到自噬小体的形成等自噬过程中的关键步骤。例如在细胞内环境中,当细胞需要进行自噬以清除受损的细胞器或者多余的蛋白质时,LC3会发生一系列的修饰和定位变化,从弥散在细胞质中的形式转变为聚集在自噬...
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目前文献对自噬过程进行观察和检测常用的策略和手段有:通过western blot检测LC3的剪切;通过电镜观测自噬体的形成;在荧光显微镜下采用GFP(-RFP)-LC3等融合蛋白来示踪自噬体形成以及降解。近几年对自噬流的研究日趋增多,针对于此我们汉恒生物科技(上海)有限公司自主研发了用于实时监测自噬(流)的mRFP-GFP-LC3腺病毒,mRFP...
细胞内表达的GFP-LC3-RFP-LC3ΔG融合蛋白经Atg4内肽酶加工,断裂成GFP-LC3和RFP-LC3ΔG,后者缺乏与膜结合所需的C末端甘氨酸。GFP-LC3和RFP-LC3ΔG分别充当自噬底物和内对照。GFP-LC3相对于RFP-LC3ΔG的比值与自噬强弱呈负相关。这种方法可以使用流式细胞仪或荧光酶标仪检测自噬。2.3.4 Keima Keima是一种独...
英文名称: pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG哺乳自噬质粒 保质期: 3个月/12个月以上 保存条件: -20℃/-80℃ pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG哺乳自噬质粒信息 规格:2ug 保质期:3个月 保存温度:-20℃ 使用说明 1、收到质粒干粉后请5000rpm离心1min ,再加入20ul ddH2O溶解质粒 2、取2ul质粒转化至100ul...
结论 成功建立稳定表达 RFP-GFP-LC3 的RAW264. 7 细胞株,为自噬研究建立了可靠细胞平台。[关键词] 自噬;慢病毒;RAW264. 7 细胞;稳定表达[中图分类号] R392. 12,Q344+. 13,R329. 2+ 5[文献标志码] AEstablishment of RAW264. 7 cell strain stably expressing RFP-GFP-LC3WANG Wan 1 ,ZHANG Qing ...
质粒名称: pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG 出品公司: Addgene 目录编号: 84572 存储实验室: Noboru Mizushima 载体骨架基本信息 载体名称: pMRX-IP 载体出品公司: -- 载体抗性: 氨苄青霉素 空载体大小: 6100 bp 完整质粒大小: 8300 bp 载体修饰: -- 载体类型: 哺乳动物表达,逆转录病毒 筛选标记: 嘌呤霉素 ...
摘要:为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血清饥饿处理细胞,结果显示:饥饿组GFP/RFP荧光点比值较对照组下降,P62蛋白表达量...
相关信息:产品目录(40582) 用户评价 英文名称:LentiBrite RFP-LC3 Lentiviral Biosens 欣博盛生物科技有限公司 联系电话:4006-800-892 电子邮件:info@neobioscience.com CB指数:58 网址:www.nbs-bio.com 相关信息:产品目录(6207) 用户评价 英文名称:LentiBrite RFP-LC3 Lentiviral Biosens Tag...
This probe is cleaved to produce GFP-LC3 and RFP-LC3螖G, the former of which is degraded by autophagy, and the latter of which is maintained in the cytoplasm to serve as an internal control. Autophagic activity can be simply and quantitatively estimated by determining the ratio of GFP and ...