汉恒独家推出双荧光LC3细胞自噬腺病毒 双荧光指示体系:汉恒生物科技(上海)有限公司已开发出用于产品。 mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 我们在显微镜成像后红绿荧光merge后通过merge后出
近几年对自噬流的研究日趋增多,针对于此我们汉恒生物科技(上海)有限公司自主研发了用于实时监测自噬(流)的mRFP-GFP-LC3腺病毒,mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。这种串联...
2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 利用绿色荧光蛋白(GFP)在酸性环境中淬灭的特性,研究人员开发出了GFP-LC3工具检测自噬,可使用流式细胞仪定量检测,但使用荧光显微镜检测效果不够理想。2.3.2 RFP-GFP-LC3 在GFP-LC3的基础上,研究人员开发了GFP-RFP-LC3工具,红色荧光蛋白(RFP)在酸性环境中信号稳定。...
TagRFP-LC3 可识别从吞噬细胞到自噬体的自噬结构,在雷帕霉素处理的 MEFs 中DALGreen标记了61.8%的TagRFP-LC3点(自噬溶酶体阶段),其余的TagRFP-LC3点被认为是吞噬细胞和自噬体。DAPRed探针标记了65.7%的GFP-LC3点(吞噬体、自噬小体和自噬溶酶体)。其余的 GFP-LC3 点被认为是早期吞噬体。CQ(或 BafA1)...
自噬双荧光标记慢病毒吉满自主研发的双荧光自噬慢病毒,可用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。由于自噬溶酶体内的酸性环境,导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱表明溶酶体与...
红色荧光点-绿色荧光点-LC3(redfluorescencepoint-greenfluores-cencepoint-LC3,RFP-GFP-LC3)融合蛋白是一种方便的自噬荧光蛋白标记物。在自噬发生初期, 胞浆型LC3转变为膜型LC3,在荧光显微镜下可观察到红色/绿色共定位的点状聚集。自噬后期,溶酶体与自噬体融合形成自噬溶酶体,细胞环境pH发生变化。当环境pH<5时,GFP...
RFP-GFP-LC3自噬双标质粒涵盖的具体项目? 参考哪些标准? RFP-GFP-LC3自噬双标质粒服务检测周期多久呀? 对样品有什么要求? RFP-GFP-LC3自噬双标质粒如何收费? 具备哪些检测资质? RFP-GFP-LC3自噬双标质粒涵盖的具体项目? 参考哪些标准? RFP-GFP-LC3自噬双标质粒服务检测周期多久呀? 对样品有什么要求?看...
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激光共聚焦荧光显微镜分析感染效率,饥饿处理稳定感染细胞,激光共聚焦荧光显微镜下观察RFP-GFP-LC3斑点.结果:经感染和嘌呤霉素筛选获得稳定表达RFP-GFP-LC3的RAW264.7细胞系;激光共聚焦荧光显微镜显示RFP和GFP荧光率均达95%以上,饥饿处理后自噬斑点显著增多.结论:成功构建稳定表达RFP-GFP-LC3的RAW264.7细胞系,为后续自噬...
This chapter provides methods involving the recently developed autophagic flux probe GFP-LC3-RFP-LC3螖G. This probe is cleaved to produce GFP-LC3 and RFP-LC3螖G, the former of which is degraded by autophagy, and the latter of which is maintained in the cytoplasm to serve as an internal ...