原因如下：采用Syber green的real-time PCR有可能扩增非特异性产物，光看PCR产物的信号无法区别到底是特异性产物还是非特异性的。由于扩增的序列已知，可以计算该序列的TM值，也就是加热到该温度，50%双链打开的。Syber green只有结合DNA双链才有荧光，所以PCR反应结束后，对产物进行加热，每加热一度，测...
PCR循环(×40循环): 95℃15s60℃15s72℃45s(data collection)↓ 融解曲线分析(Melting Curve Analysis) [PCR循环(例2)](两步法,退火/延伸温度60℃) 95℃60s ↓ PCR循环(×40循环): 95℃15s60℃60s(data collection↓ 融解曲线分析(Melting Curve Analysis) 五、 制备用于绘制梯度稀释标准曲线的DNA模板 针对...
In this study, a real-time PCR with melting curve analysis was established for molecular typing of V. parahaemolyticus . Eighteen large variably presented gene clusters (LVPCs) of V. parahaemolyticus which have different distributions in the genome of different strains were selected as targets. ...
we develop a novel analytical real-time PCR technique to detect multiple targets in a single fluorescence channel without melting curve analysis. In this technique, we show the intensity of the fluorescence signals of two discrete Tmtargets is different...
实时荧光定量PCR原理和定量方法 一、荧光定量PCR的原理 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实现了实时监测整个PCR进程，对起始模板进行定量分析的方法。三个关键词：实时，定量，荧光 1、定量与常规PCR的差别 常规PCR技术：对PCR扩增反应的终产物进行定量及定性分析定量PCR技术：通过对PCR扩增反应中每一个...
Real-Time PCR快速反应液(染料法) 本制品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real-Time PCR的专用试剂,可对目标DNA进行快速、特异性的定量检测。优化的预混液可缩短Real-Time PCR的反应时间,适用于标准或快速PCR仪。 QuickFire qPCR PreMix采用了抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶,配合独特的快速PCR Buffer体系可确保在...
Real-timePCR概述 实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBiosystems公司推出，该技术是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术在常规PCR基础上运用荧光能量传递(fluorescenceresonanceenergytransfer，FRET)技术，加入荧光标记探针，巧妙地...
and Bottero, M.T., 2007. Identification of four tuna species by means of Real-Time PCR and melting curve analysis. Veterinary Research Communications , 31 ( Suppl. 1 ), 355–357关键词:ATPase 6 canned tuna melting curve Real-Time PCR species identification ...
Real-Time PCR预混反应液(染料法)(40-60%) 英文名称: SuperReal PreMix Plus(SYBR Green) 总访问: 276 国产/进口: 国产 半年访问: 18 产地/品牌: 百奥莱博 产品类别: 分子生物学试剂 规格: WH0103 最后更新: 2024-11-4 货号: WH0103 CAS 号: 参考报价: 立即询价 电话咨询 ...
RealTimePCR 荧光定量PCR化学原理 荧光定量PCR数学原理常用荧光定量PCR仪器Troubleshooting 聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction,PCR)PCR反应的特点 特异性强引物与模板结合的特异性及聚合酶的忠实性灵敏度高指数增长，从pg(10-12)可扩增至ng(10-6)水平简便、快速2...