AlleleID® designs real time PCR primers that are optimized for the following chemistries viz. TaqMan®, TaqMan® MGB, molecular beacons and FRET. These real time PCR primers are specific, efficient and compatible with the probe that they work with: Primer Specificity:Primers are designed ...
实时荧光定量PCR(realtime PCR)一、 样品RNA的抽提 1. 取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。 2. 两相分离 每1 ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2 ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12 000 rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相,...
This online tool helps you to design primers and probes for your Real-time PCR (TaqMan) experiments. Use the default settings to get the results in seconds. Customize any criterion to optimize the results. OrganismHumanMouseRatOther WhenPick Primer/Probe Crossing Exon Junctionis selected, the ex...
Specific Primer(2 μM) 0.5 μl(1 pmol) *2 反应体系可按需求相应放大,10 μl反应体系可最大使用1 μg的Total RNA。 *3 应用Gene Specific Primer时,建议反转录反应条件设置为42℃15min。PCR反应有非特异性扩增时,将温度升到50℃会有所改善。 ③ 将得到的RT反应液加入到下一步的Real Time PCR反应体系...
引物设计软件:Primer Premier 5.0,并遵循以下原则:引物与模板的序列紧密互补;引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构;引物不在模板的非目的位点引发DNA聚合反应(即错配)。 八、电泳 各样品的目的基因和管家基因分别进行Real time PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳,核酸染料染色,检测PCR产物是否...
实时聚合酶链式反应（Real-time PCR，RT-PCR）是一种高效、灵敏且广泛应用于分子生物学和医学研究的技术。它结合了传统PCR技术和荧光探针的使用，使我们能够实时监测PCR反应过程中目标DNA或RNA的扩增量，从而可以准确快速地定量分析样本中的特定分子。RT-PCR的工作原理非常简单，它包括三个主要步骤：逆转录、PCR扩增和...
Real Time PCR 實驗配置說明15 分鐘瀏覽講座 Real-Time PCR 原理45 分鐘瀏覽講座 Real-Time PCR 實驗設計22 分鐘瀏覽講座 Primer & TaqMan Probe 設計軟體 - Primer Express v2.0 操作說明14 分鐘瀏覽講座 Primer & TaqMan Probe 設計軟體 - Primer Express v3.0 操作說明12 分鐘瀏覽講座 ...
今天来学习一下Real Time PCR和Real Time RT PCR。 Real Time PCR 按实验方法可以分为: 以下我们主要介绍Real Time RT PCR。进行Real time RT PCR时,首先要选择合适的反转录引物。反转录引物一般有三种:Random…
如何区分qPCR,RT-PCR,real-time PCR? 实验加油站 1.5万 4 实验入门-qPCR和PCR引物设计方法 天天G_ 1615 1 ★qPCR引物设计★NCBI引物设计|Blast特异性验证|Primer bank|Primer3Plus全面√ 勇敢小羊向前冲_ 1.0万 17 如何根据Primer6设计双链合成引物和定量引物?及设计引物的规则 衍楚素白 739 0 超详细...
实时荧光定量PCR(Real-TimePCR)实验流程 四.RNA反转录为cDNA 反转录程序(以MBI的M-MLV为例) 组份加量(20ul体系)加量(40ul体系) 模板(RNA)0.1~2.5ug(根据条带的亮度适当调整)3ug(根据条带的亮度适当调整) 引物T18(50uM)(或其他引物)2.0ul4.0ul ...