2. 实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR, qPCR）实时荧光定量PCR，也叫Real-Time PCR，即二代PCR，是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或者荧光基团，在整个PCR过程中通过收集荧光信号实时监测每一个循环中扩增产物量的变化，最后通过标准曲线和CT值对待测样品进行定量分析。qPCR常用的有两种方法：SYBR Green...
很多人误以为RT-PCR是Real-time PCR的缩写,因此将二者混为一谈,但实际上是不一样的,国际上的约定俗成的是:RT-PCR特指反转录PCR,而Real-time PCR一般缩写为qPCR(quantitative real-time PCR)(见前面的介绍)。 下面详细介绍反转录PCR (1)反转录PCR 反转录PCR(Reverse Transcription - PCR,RT-PCR),是PCR的一...
2. qPCR,实时荧光定量PCR,Real-timeQuantitative PCR qPCR是一种用于快速和精确测量DNA或RNA样本中的特定目标序列数量的分子生物学技术。该技术结合了PCR和荧光探针技术,通过监测PCR反应过程中荧光信号的数量来实时测量目标序列的数量。与传统的末端定量PCR方法相比,实时荧光定量PCR具有更高的灵敏度和特异性,并且可以在PC...
PCR,按发展时间先后顺序,可以大致分为:普通PCR、实时荧光定量PCR、数字PCR三大类。上面提到的RT-PCR、qPCR、RT-qPCR、Real-Time PCR 和 dPCR 等,都是这三大类的简称或相关组合。 #01 普通PCR(口语上直接说“PCR”) 普通PCR即第一代PCR技术,以双链DNA为模板,以dNTP为底物进行扩增,特异性地扩增双链DNA,采用...
其实Real-time-PCR 和 qPCR 是一码事,都是实时定量 PCR,指的是 PCR 过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精确的分析。 虽然Real-time PCR(实时荧光定量 PCR)和 Reverse transcription PCR(反转录 PCR)看起来都...
Real-time PCR Real-time PCR的中文名字是实时聚合酶链式反应,也被称作实时荧光定量PCR,简称qPCR。 需要注意的是,"Real-time PCR"与"qPCR"(Quantitative PCR),通常是指同一种技术。而RT-PCR虽然与Real-time PCR的简写相同,但试剂上是两种不同的技术。
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合。 PCR反应体系主要包含以下五种成分:模板(template)、引物(primers)、底物(dNTP)、DNA聚合酶、PCR缓冲液(PCR buffer)。 总结 PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR这四种技术都是基于聚合酶链式反应(PCR)的技术,主要区别在于它们的应用领域和检测目标不同。PCR主要用于DNA序列的扩...
Real-time RT-PCR，即RT-qPCR，是这两个过程的结合，首先通过逆转录将RNA转化为cDNA（即从mRNA或总RNA模板），然后使用实时荧光PCR进行定量分析。这种技术不仅能检测cDNA，还能应用到基因组DNA等模板上，实现了定性和定量的双重功能。所以，理解关键在于区分它们的不同应用和功能：RT-PCR侧重于RNA到DNA的...
PCR、qPCR、RT-PCR和Real-time PCR是分子生物学领域中常见的技术，但它们之间存在一些关键区别。首先，PCR（聚合酶链式反应）是一项基础技术，通过指数级放大DNA片段，简化了之前对DNA样本的处理。其主要步骤包括变性、退火和延伸，从而形成大量相同的DNA拷贝。qPCR（实时荧光定量PCR）是PCR的一种进阶版本，...