所使用的抗体的来源和目录编码在文章中标注。 raav载体 血清型raav1,raav2,raav5,raav6,raav7,raav8和raav9 的腺相关病毒从维真生物(vigene)公司获得。这些病毒是用三质粒共转染293细胞包装制备的。主要的质粒pav-u6-gfp含有aav2 itrs序列,u6启动子后面有shrna插入位...
主要的质粒pAV-U6-GFP含有AAV2 ITRs序列,U6启动子后面有shRNA插入位点,CMV启动子启动EGFP基因表达,氨苄青霉素抗性。Rep 和 Cap质粒以及辅助质粒提供了病毒复制机器的组件和决定AAV血清型的衣壳蛋白。HEK293细胞裂解后,病毒颗粒通过碘克沙醇梯度超速离心进行纯化。有关这些病毒的详细信息及他们的包装和纯化过程可以在...
在一些实施方案中,表达包括核酸的转录,例如以从转录的基因产生生物活性多肽产物或抑制性rna(例如,shrna,mirna,mirna抑制剂)。用于将重组载体包装在期望的aav壳体中以产生本公开的raav的前述方法并不意味着是限制性的,并且其他合适的方法对于技术人员将是显而易见的。重组aav载体本公开的分离的核酸可以是重组aav(ra...
这些病毒是用三质粒共转染293细胞包装制备的。主要的质粒pAV-U6-GFP含有AAV2 ITRs序列,U6启动子后面有shRNA插入位点,CMV启动子启动EGFP基因表达,氨苄青霉素抗性。Rep 和 Cap质粒以及辅助质粒提供了病毒复制机器的组件和决定AAV血清型的衣壳蛋白。HEK293细胞裂解后,病毒颗粒通过碘克沙醇梯度超速离心进行纯化。有关这些...
主要的质粒pAV-U6-GFP含有AAV2 ITRs序列,U6启动子后面有shRNA插入位点,CMV启动子启动EGFP基因表达,氨苄青霉素抗性。Rep 和 Cap质粒以及辅助质粒提供了病毒复制机器的组件和决定AAV血清型的衣壳蛋白。HEK293细胞裂解后,病毒颗粒通过碘克沙醇梯度超速离心进行纯化。有关这些病毒的详细信息及他们的包装和纯化过程可以在...