新版的软件现在都使用Cq值,而非Ct值,这无需过多关注。理想的Cq值范围在15到25之间,这是最佳表现。如果Cq值落在10到30之间,也属于可接受的范围。然而,如果Cq值超过了30,就需要仔细检查复孔的一致性。如果复孔结果一致,可以继续使用。但如果复孔结果不一致,则该结果基本上是无效的。在解读Cq...
1、整理数据 只留下sample、target、Ct(Cq),依次排列 图1 整理后的数据格式示意 2、计算内参的Cq mean 新建一栏mean,计算内参同一sample的Cq平均值。选择三个格子为一组,点击右下角下拉填充格式。 图2 选择示意图 3、对齐数据 将内参的mean值复制到对应的目的基因Cq值后面 图3 不要有空白列,图中是错的 4...
如何看QRT-PCR 结果中的Cq值(1)|qrt-pcr这样算:你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异,就可以计算标准差了。这么简单的统计分析,用不着SPSS吧, excel就可以解决了。追问 : 谢谢
表中数据解释: Gene Ct即基因采集到的循环阈值,有的仪器上显示Cq(q前边原理以讲解),β-Actin原理与Gene Ct一样;△Ct=gene Ct -β-Actin Ct;参考△Ct=NC △Ct均值;△△Ct=△Ct- 参考△Ct;相对表达量即2^-△△Ct:Excel输入方法“=power(2,-△△Ct)”(注意数值就是G列数值取负数)或输入“=2^-△△...
3476 0 27:27 App qPCR的Ct值(Cq值)的分析 1.3万 7 51:07 App 【实验指南】荧光定量2-△△ct方法计算相对表达量 3009 0 06:52 App PCR数据处理-使用Excel计算Delta Ct -How To Perform The Delta-Delta Ct Method (In Excel) 8569 0 02:11 App ROCHE Light Cycler 96 数据分析 2535 0 06:36 ...
Gene Ct即基因采集到的循环阈值,有的仪器上显示Cq(q前边原理以讲解),β-Actin原理与Gene Ct一样;△Ct=gene Ct -β-Actin Ct;参考△Ct=NC△Ct均值;△△Ct=△Ct-参考△Ct;相对表达量即2^-△△Ct:Excel输入方法“=power(2,-△△Ct)”(注意数值就是G列数值取负数)或输入“=2^-△△Ct”,^是输入法在...
Cq:Quantification Cycle定量循环数 Cp:Crossing point阈值线与扩增曲线的交点 以上三种术语在实时仪器上值都是相同的,本文以Cp值表示。 RNA质量:主要受两个方面的影响,RNA的完整度与RNA的纯度。 RIN:RNA integrity number,作为表示RNA完整度的参数;RIN值越大,表明RNA的完整度越高。
新版的软件都叫Cq值,不叫Ct值了,不必理会。Ct值15-25是最好,10-30之间也接受。如果超过30了,得看一下复孔是否一致,如果一致,也接受。如果不一致,基本就是废的。
△Cq为同一DNA模板的目的基因与内参GAPDH之间的差值,即△Cq=Cq目的基因-CqGAPDH。注意在计算前需要先查看复孔值,若复孔值之间差别太大则不可信。△△Cq为同一目的基因的实验组与对照组之间的差值,即△△Cq=△Cq实验组-△Cq对照组。注意对照组内也要进行比较计算,以便确定对照组的组内差异是否过大,是否可信。
BestKeeper小程序是基于Excel的工具根据Cq值的标准差进行评估参考基因的稳定性。较低的SD-value表示基因更为稳定。BestKeeper排序表明ACTIN1是最稳定的参考基因在不同的组织和果实发育时期的样本中和低温处理的样本中。HISTH4在光质处理下表现更好。以及在全部的样本中,HISTH4也是最好的参考基因。此外,18S、PIRUV和ACTIN...